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菜用大豆[Glycine max(L.)Merr.],又称毛豆,其籽粒富含蛋白质、游离氨基酸、维生素、矿质元素和膳食纤维等,营养价值高,因而深受消费者青睐。随着市场需求的增大,其栽培面积正迅速扩大。菜用大豆在我国栽培历史悠久,其主要产区在长江中下游和东南沿海地区。然而,由于我国南方红壤地区土壤特殊的理化性质,磷素极易被固定,使得自然土壤中的有效磷含量非常低,限制着植物的生长发育。低磷胁迫已经成为限制菜用大豆生产的主要因素之一,严重影响菜用大豆的产量和品质。水稻OsPT6基因编码高亲和磷转运蛋白,在磷素的吸收和体内转运过程中起重要作用。为提高菜用大豆的磷素吸收,获得磷高效吸收菜用大豆新种质,本研究以菜用大豆品种‘NY-1001,为转化受体,将OsPT6基因通过农杆菌介导法遗传转化菜用大豆,获得了稳定遗传的转基因植株,并采用营养液栽培法对转OsPT6基因菜用大豆T2代植株进行耐低磷鉴定。主要研究结果如下：1.根据NCBI公布的水稻OsPT6基因序列,设计特异性引物,PCR扩增OsPT6基因编码区,基因两端分别引入酶切位点SacI和XbaI,通过酶切连接的方法将OsPT6基因插入到经改造的pCAMBIA3301载体中CaMV35S启动子和NOS终止子之间,成功构建了以gus基因作为报告基因,bar基因作为选择标记基因的植物表达载体pCAMBIA3301-OsPT6。经酶切验证后,将该载体通过冻融法导入农杆菌菌株EHA105,得到EHA105/pCAMBIA3301-OsPT6工程菌。2.通过农杆菌介导子叶节遗传转化法将OsPT6基因导入菜用大豆,成功获得2株可育的转基因植株(编号12PT6-1和12PT6-2)。Southem杂交分析显示,OsPT6以单拷贝的形式成功整合到菜用大豆的基因组中。Basta抗性检测表明转基因植株具有除草剂抗性。GUS组织化学分析和PCR检测表明,外源基因在转基因植株后代稳定遗传,并且在T1代中出现了分离,分离比符合盂德尔3：1遗传分离模型。通过筛选获得了三个T2代纯合体转基因株系(12PT6-1-1.12PT6-1-14和12PT6-2-8),并且qRT-PCR检测结果表明OsPT6基因在纯合体转基因植株中超表达。3.采用营养液栽培对T2代转基因株系进行转基因植株特性鉴定。在低磷(10μMPi)和正常磷(1000μM)培养条件下,转基因植株叶片、茎和根部的有效磷和全磷含量显著高于非转基因(NT)植株。在低磷条件下,转基因植株生长状态良好,没有出现缺磷症状,并且株高、根长、根部鲜重和干重、叶面积及产量显著高于NT植株。以上结果表明,转OsPT6基因菜用大豆具有磷高效吸收特性。