乌鸡血粉制备工艺及其抗血栓作用的初步研究

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乌鸡血是一种高蛋白质资源,其营养成分丰富,具有养气益血,调节生理机能、增强免疫力的功能,而且据村井善雄报道其还有抗血栓的特性。而目前市场上所生产的产品主要利用的是乌鸡的肉、蛋、骨,对乌鸡血液的利用还较少,我国目前对乌鸡血的利用除了小部分被用来开发成附加值较低的饲用血粉及一些单一的产品外,大部分乌鸡血被当成废弃物浪费掉,不仅造成了乌鸡血这种宝贵资源的浪费,还会引起环境的污染。而现有畜禽血液血粉生产工艺所生产的血粉普遍存在有色泽深、适口性差和消化性差的缺点,阻碍了禽畜血液的进一步开发利用。本课题立足于乌鸡血的综合利用,同时对乌鸡血粉的抗凝溶栓特性进行初步探索,为充分利用乌鸡血液资源,探明乌鸡血粉的抗血栓作用提供一定的理论依据。从而增加产品附加值,创造可观的经济价值。试验采用间歇式超声破碎的方式进行细胞破碎,选取AS1.398中性蛋白酶进行酶解,然后采用活性炭进行脱色处理,经单因素和正交试验分别对酶解pH、酶加量、温度、底物浓度、酶解时间和脱色温度、pH、脱色时间、活性炭使用量进行优化,确定了最佳酶解脱色工艺条件。另外,将乌鸡原血液、酶解液、脱色液分别经冷冻干燥成粉后,以生理盐水为阴性对照,肝素钠为阳性对照,在体外抗凝血试验、体外溶血栓试验和体外血栓溶解率试验的基础上,分别考查了各阶段血粉的抗凝血作用,对刚成型血栓的抗形成作用以及对已成型血栓的溶解作用大小。同时考查了不同剂量(2.5g/L、1g/L、0.5g/L)的各阶段血粉的体外抗血栓作用。最后对各阶段血粉进行了感官评定和理化功能性质的检测。试验研究结果如下:(1)较之传统的机械破碎法,采用间歇式超声破碎对新鲜乌鸡血的破碎程度更高,效果更好,且初步探明其破碎条件为:功率200W,间歇时间5s,工作时间5s,工作次数60次。(2)AS1.398中性蛋白酶酶解的最佳工艺条件为:pH7.5,酶加量为8000U/g,温度为45℃,底物浓度为8%,酶解时间6h,此条件下水解度能达到22.22%,血红素含量为0.62mg/mL。(3)活性炭对乌鸡血酶解液脱色的最佳脱色参数为:温度70℃,pH5,脱色时间60min,活性炭使用量3%的,在此条件下,蛋白质的保留率能达到66.38%,脱色率能达到84.81%。(4)初步判定了乌鸡血各阶段的血粉均具有一定的抗凝和抗血栓形成及溶血栓作用,且剂量越高,抗性越大。但三者的抗性作用相对于阴性组效果较显著,相对于阳性组效果不显著,而且三种血粉的抗血栓作用的能力逐渐降低。(5)通过感官评定和性能检测可知经酶解-活性炭脱色最佳工艺条件处理的脱色血粉,具有较好的功能特性,基本上解决了血腥味和适口性差的缺点,而且还最大限度的保留了乌鸡血的原始营养价值。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳试验大致确定了三种血粉中分别含有5种、4种、4种不同分子量的蛋白质。
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