人胚胎干细胞（hESCs）是发育生物学研究和再生医学研究的重要材料。不同hESCs细胞系之间的基因表达、表观遗传学模式以及分化倾向存在差异。建立更多的hESCs系有助于增加对细胞特性的了解。同时，在现有基础上优化hESCs的建系方法对于获得达到临床应用级别的hESCs至关重要。目的：以优化的建系方法，获得hESCs细胞系并探索其向神经细胞分化的能力。方法：使用1ml注射器分离内细胞团（ICM）建立hESCs系，并将其培养于小鼠胚胎成纤维细胞（MEF）和人包皮成纤维细胞（HFF）制成的混合饲养层上，以机械法和酶消化法传代培养。随后将建立的hESCs系进行全能性鉴定，包括检测干性基因表达和体内外分化潜能。最后，将建立的hESCs细胞系于体外进行定向诱导，检测其分化成神经细胞的能力。结果：本研究使用1ml注射器以全机械法成功建立一株hESCs细胞系HN4，此细胞系具备hESCs的特性：典型的克隆形态；具有碱性磷酸酶活性；表达Oct-4,Nanog,Rex-1,SSEA-3, SSEA-4, Tra-1-60, Tra-1-81,；体外长期传代能维持正常的核型；具有在体内外分化成具有三个胚层来源组织的能力。同时，HN4能够在体外定向诱导分化成神经干细胞和神经细胞。意义：本研究创新使用的1ml注射器全机械建系法省时省力、经济、无异源化合物污染，是一项值得广泛推广的建系方法。本研究建立的hESCs细胞系具有分化全能性并且具备定向分化为神经细胞的潜能，是体外研究人胚胎发育和神经系统发育以及神经退行性疾病治疗研究的理想细胞系。