本课题组获得的副干酪乳杆菌（Lactobacillus paracasei） HD1.7,能产生有抗菌作用的副干酪乳杆菌素。本文分别选取两种固定方法,利用统计学方法对该菌固定化条件和其产生的副干酪乳杆菌素的发酵条件进行优化,以期选取一种较理想的固定化方法,从而提高副干酪乳杆菌素的产量和缩短周期,节约成本,为副干酪乳杆菌素的进一步研究和最终提取奠定基础。通过对固定材料性质及成本的研究,确定了两种较理想的固定化方法,分别为海藻酸钙法和聚乙烯醇-海藻酸钠法。海藻酸钙法首先利用单因素试验研究了CaCl₂浓度、海藻酸钠浓度、固定化时间、固定化颗粒接种量、发酵时间和菌体包埋量（菌胶比,离心后湿菌体重量g/海藻酸钠胶体体积mL）对副干酪乳杆菌素的影响,并用26?2部分因子分析法筛选对副干酪乳杆菌素产量影响显著的因子,发现海藻酸钠浓度、接种量和发酵时间对副干酪乳杆菌素的产生影响显著。利用最陡爬坡法逼近最大响应区域。用Box-Behnken设计确定最佳海藻酸钠浓度2.8%、CaCl₂浓度5%、固定化时间4h、菌体包埋量1/20、发酵时间63h和固定化细胞的接种量8.2%,在此基础上用固定化细胞进行分批重复发酵,除第1个发酵周期为63h,第2-14个发酵周期均为24h,副干酪乳杆菌素活力基本不变,约为410AU/mL,产量为游离发酵的91%,但发酵周期比游离细胞缩短1/2。与游离细胞发酵相比,固定化细胞在375h的分批重复发酵中副干酪乳杆菌素的总体产量比游离细胞提高了1.6倍聚乙烯醇-海藻酸钠法利用单因素试验研究了影响副干酪乳杆菌素产量的PVA浓度、海藻酸钠浓度、硼酸浓度、氯化钙浓度、固定化时间、固定化颗粒接种量、发酵时间和菌体包埋量（菌胶比,离心后湿菌体重量g/海藻酸钠胶体体积mL）,并用Plackett-Burman试验筛选对副干酪乳杆菌素产量影响显著的因子,发现接种量、发酵时间、硼酸浓度、PVA浓度对副干酪乳杆菌素的产生影响显著。利用最陡爬坡法逼近最大响应区域。用Box-Behnken设计确定最佳固定化细胞接种量为13.8%、发酵时间为70.5h、硼酸浓度4.8%、PVA浓度9.45%,并在此基础上用固定化细胞进行分批重复发酵,除第1个发酵周期为70h,第2-21个发酵周期均为27h,每批副干酪乳杆菌素产量约为游离发酵的67%。与游离细胞发酵相比,固定化细胞在610h的分批重复发酵中副干酪乳杆菌素的总体产量比游离细胞提高了1.15倍。通过对两种固定化方法的生产成本、副干酪乳杆菌素的生产周期以及产量的比较,发现海藻酸钙包埋法制备容易、生产周期短,生产成本低且产量较高,更有利于副干酪乳杆菌素的产生,因此选择海藻酸钙包埋法为较理想的固定化方法。