【摘 要】
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前言 乙肝病毒(HBV)的感染呈世界性的分布,乙肝病毒基因组分为多个亚型,一种是根据S区的氨基酸差异划分的血清型,一种是根据核苷酸序列差异划分的基因型。目前对乙肝基因
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前言 乙肝病毒(HBV)的感染呈世界性的分布,乙肝病毒基因组分为多个亚型,一种是根据S区的氨基酸差异划分的血清型,一种是根据核苷酸序列差异划分的基因型。目前对乙肝基因分型方面的研究表明:HBV的临床特点、预后及治疗结果与HBV的基因型有关,与血清型的关系不明显,所以HBV的基因分型对于临床有重要的指导意义,越来越受到重视。目前临床上对乙肝病毒检测的方法基本是ELISA方法,对乙肝病毒的基因分型通常采用测序的方法,HBV分型试剂正在研究和开发中。 基因芯片的问世为HBV的分型检测提供了一个较好的解决方法,本课题目的在于建立用于HBV病毒检测和分型基因芯片的探针设计和芯片制备方法,建立一个比较完整的基因芯片点样、封闭、杂交和检测的操作体系,并对芯片的特异性、灵敏度和重复性进行测试和分析,对HBV芯片在临床上的应用进行了探索。 实验材料 芯片引物和探针,由上海生工公司合成。 PCR试剂盒,购于华美公司。 临床血清标本来自中国医科大学第一和第二临床附属医院。 仪器:芯片扫描仪(Genomic Solution,Inc),生物芯片点样仪MicroGridⅡ(BioRobotics Lid.),PCR扩增仪(Biometra Personal PCR system,Germany),稳压稳流电泳仪(BIO-RAD MiniⅡ,USA),低温离心机(SIGMA,D-37520,Germany),数显电热恒温干燥箱(202-0,上海阳光实验仪器有限公司)
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