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目的:临床研究表明HIF-1α与结肠癌的临床特征密切相关,本研究采用脂质体法转染介导的si RNA干扰技术,将干扰序列转染SW480人结肠癌细胞并沉默HIF-1α表达,同时,观察沉默后SW480细胞生物学特性的改变以期阐明HIF-1α基因对结肠癌肿瘤特性的影响。方法:使用脂质体法si RNA技术转染SW480人结肠癌细胞株,并根据转染时处理方式的不同将细胞株分为干扰组、阴性对照组、空载体组、空白对照组;使用Real-time PCR技术对细胞株HIF-1α的m RNA表达进行检测并计算沉默率;使用Western-blot技术对细胞株HIF-1α的蛋白表达程度进行检测,并评估蛋白表达水平;使用四甲基偶氮唑盐法(MTT)技术评估细胞株的细胞增殖能力;采用流式细胞仪技术及Annexin V-PI双染法检测细胞株凋亡;采用Luminometer技术检测细胞株的细胞内ATP含量。结果:干扰组沉默率均>80%,空载体组及阴性对照组均<6%,证明SW480细胞HIF-1α的表达受抑,符合预期要求;干扰组、阴性对照组、空载体组、空白对照组的HIF-1α蛋白的相对表达量在各时间点具有明显统计学差异(F=12.473,p=0.012)。干扰组蛋白的相对表达量明显低于其他3个对照组(P均<0.05),但其余三组之间无统计学差异;SW480人结肠癌细胞各时间点各组间OD值均数均有差异(P<0.05);干扰序列转染组与阴性对照组比较有显著差异(P<0.05),且细胞增殖随时间延长明显受抑;HIF-1α干扰组、阴性对照、空载体、空白对照组早期凋亡率分别为45.36%、4.43、3.48%、3.41%。晚期凋亡及坏死率分别为22.92%、4.75%、3.65%、3.74%。干扰组早期凋亡率及晚期凋亡和坏死率较阴性对照组、空载体和空白对照组显著增加(P均<0.05),而后三者间两两比较无显著性差异(P>0.05);人结肠癌SW480细胞株细胞内ATP浓度在各时间各组间的表达均有明显统计学差异(P均<0.05);组内多重比较可知:培养后1-5天均表现为干扰组ATP含量明显低于阴性对照组、空载体组及空白对照组,而其余三组之间两两比较P均>0.05。此外,所有分组的人结肠癌SW480细胞株细胞内ATP浓度均随观察时间的推移而进行性降低(P均<0.05)。结论:脂质体法si RNA技术转染干扰序列有效沉默人结肠癌SW480细胞株HIF-1α表达;HIF-1α沉默后可抑制人结肠癌SW480细胞生长,促进肿瘤细胞早期及晚期凋亡,并降低肿瘤细胞的ATP生成,且上述影响呈时间依赖性。