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第一部分TRPC6通道对食管鳞癌细胞株Eca109细胞周期的影响目的探讨TRPC6通道对食管鳞癌细胞株Eca109细胞周期的影响。方法 (1)流式细胞仪分析TRPC6通道阻断剂SKF96365阻断TRPC6通道后对食管鳞癌Eca109细胞周期的影响；(2)用Ad-DNC6转染Eca109细胞后,采用流式细胞分析的方法探讨阻断TRPC6表达后Eca109细胞周期的变化；(3)转染Ad-DNC6阻断或下调TRPC6通道后,采用Western blot技术检测与细胞G2/M期密切相关的pY15-cdc2蛋白和cyclinBl蛋白的表达变化。结果 (1)用SKF96365预处理Eca109细胞后,随着孵育时间延长,处于G2/M期的细胞数目逐渐增加,处于GO/G1期的细胞逐渐下降,且这种趋势呈时间依赖性；(2)用DNC6转染Eca109细胞阻断TRPC6后,处于G2/M期的细胞数目明显增加,而处于G0/G1期的细胞数目明显下降,和对照组相比有显著性统计学差异(P<0.01)；(3)TRPC6通道阻断后,细胞G2/M期相关蛋白pY15-cdc2和cyclinB1表达上调。结论 阻断TRPC6通道导致Eca109细胞周期阻滞在G2/M期,说明通过TRPC6通道调控的钙离子内流可能在食管鳞癌细胞G2/M期转换过程中发挥重要作用。第二部分TRPC6通道阻断剂对食管癌Eca109细胞放疗增敏的研究目的探讨TRPC6通道阻断剂SKF96365对肿瘤细胞Eca109放疗增敏的影响。方法 (1)采用流式细胞分析的方法了解TRPC6通道阻断剂SKF96365对Eca109细胞周期的影响。(2)根据流式细胞分析的结果,在SKF96365作用8小时后对Eca109细胞进行放疗,并用CCK-8方法检测细胞活性及增殖能力。结果食管癌Eca109细胞在SKF96365作用下4小时就可以出现细胞周期的改变,G2/M期升高7.79%,SKF96365作用6小时和8小时G2/M期分别升高约31.65%、49.95%,G1期细胞明显下降,且没有细胞凋亡的发生。在这一时间点对单纯照射组、SKF96365+照射组Eca109细胞进行放疗,并用CCK-8检测细胞存活和生存情况。同时接受SKF96365孵育和放疗的Eca109细胞OD450值最小,说明细胞的增殖能力越差。结论TRPC6通道阻断剂SKF96365对食管鳞癌细胞株Eca109有明显放疗增敏作用。第三部分TRPC6通道阻断剂对食管鳞癌Eca109细胞成瘤裸鼠放疗增敏的研究目的进一步探讨TRPC6通道在食管鳞癌放疗增敏中的作用。方法用20只雄性BALB/c裸鼠,随机分成4组,分别是：对照组、SKF96365组、单纯照射组和SKF96365联合放疗组,每组5只。4组裸鼠均皮下注射Eca109食管鳞癌细胞7.5 × 105个细胞/200μl。对照组在皮下注射肿瘤细胞后第5天开始每天腹腔注入100μl的生理盐水,共7天；SKF96365组和SKF9635联合放疗组在皮下注射肿瘤细胞后第5天开始每天腹腔注射5pM SKF96365 20mg/kg,共7天；单纯照射组和SKF96365联合放疗组在皮下注瘤后第7天开始进行放疗,电子线7Mev,2Gy/d,共5天。观察裸鼠一般情况,每周测量两次肿瘤的体积,计算各组裸鼠肿瘤体积之间的不同。在接种后第六周,处死动物,拍照称重。结果裸鼠肿瘤体积的变化：用游标卡尺先测量出肿瘤的最大径线(a),然后测量与最大径线垂直的最长径线(b),单位为mm,按公式V=1/2ab2计算肿瘤体积(mm3)。在联合放疗后第6周,SKF96365联合放疗组肿瘤体积明显小于单纯放疗组,p<0.05。结论TRPC6通道阻断剂对食管鳞癌细胞株Eca109成瘤裸鼠有放疗增敏作用。