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第一部分功能化氧化石墨烯纳米载体的制备及结构表征目的制备功能化氧化石墨烯纳米载体，表征载体结构、检测有无细胞毒性及对宫颈癌Hela细胞的靶向性和转染效率。方法1、制备GO-PEG-FA-PyNH2及GO-PEG-PyNH2两种不同的功能化氧化石墨烯纳米载体。2、使用傅里叶变换红外光谱仪（FTIR）及紫外可见吸收光谱（UV）表征载体结构、原子力显微镜（AFM）观察氧化石墨烯功能化前后形态变化，证明载体是否制备成功。3、培养宫颈癌Hela细胞，通过WST实验及DAPI染色，了解所制备载体有无细胞毒性。4、用所制备两种不同的纳米载体负载DNA-FAM转染宫颈癌Hela细胞，激光共聚焦显微镜（LSCM）观察载体的肿瘤靶向性及转染效率。结果1、成功制备GO-PEG-FA-PyNH2及GO-PEG-PyNH2两种不同的功能化氧化石墨烯纳米载体，UV检测到FA及PyNH2的特征性吸收峰，说明PEG-FA和PyNH2都被负载在GO上。在FTIR光谱图中PEG和FA的连接，及PEG-FA和GO的连接得到了再次确认。AFM观察到功能化后GO的厚度有所增加，表面由光滑变为有较多突起，说明GO被修饰成功。2、通过WST实验证明，GO经PEG修饰后无细胞毒性，DAPI染色后两组细胞胞核及细胞形态无差异，GO-PEG-FA-PyNH2组细胞形态完整，胞核完整无破碎，都表明了该载体无细胞毒性。3、LSCM观察载体的肿瘤靶向性及转染效率。两种载体负载DNA-FAM转染宫颈癌Hela细胞，1h时GO-PEG-FA-PyNH2组细胞内及表面绿色荧光表达强于GO-PEG-PyNH2组，说明前者用FA修饰后可以有更好的肿瘤靶向性，但5h转染效率并无明显差别，两种载体均能高效的转染基因进入宫颈癌细胞。结论成功制备GO-PEG-FA-PyNH2及GO-PEG-PyNH2两种不同的纳米载体；该载体对宫颈癌Hela细胞无毒性；GO-PEG-FA-PyNH2有更好的肿瘤靶向性，但两种载体转染效率无明显差异。第二部分功能化氧化石墨烯载hTERTsiRNA对宫颈癌Hela细胞增殖的影响目的观察功能化氧化石墨烯负载hTERTsiRNA对宫颈癌Hela细胞增殖的影响，及该载体共载hTERTsiRNA和阿霉素的协同抑制肿瘤细胞增殖作用。方法1、设计靶向hTERT的siRNA，制备功能化氧化石墨烯载hTERTsiRNA基因复合物转染宫颈癌Hela细胞，倒置显微镜观察细胞增殖状况。2、RT-PCR及Western blot分别检测Hela细胞中hTERT mRNA及蛋白水平的表达。3、功能化氧化石墨烯共载hTERTsiRNA及阿霉素（Dox）转染Hela细胞，MTT检测细胞增殖抑制情况，了解两者是否有协同作用。结果1、转染12h、24h、48h、72h后对细胞形态及数量的观察，发现该载体基因复合物能抑制细胞增殖，促进细胞凋亡。2、RT-PCR及Western blot实验分别证明了该载体基因复合物可以很好的抑制宫颈癌细胞中hTERT mRNA及蛋白水平的表达，实验分析结果显示多组间比较差异有统计学意义（P＜0.05）。两两比较结果显示空白细胞组和单纯载体组差异无统计学意义（P＞0.05），说明该载体无细胞毒性。而其余各组间两两比较差异均有统计学意义（P＜0.05），说明所制备纳米载体较脂质体Lipo转染效率高，载体中连接叶酸者效率高，而同种载体浓度大者转染效率高，说明有一定的剂量依赖关系。3.成功制备功能化氧化石墨烯共载hTERTsiRNA及阿霉素转染宫颈癌细胞，通过MTT实验测定各组细胞的吸光值，发现GO-PEG-FA-PyNH2共载siRNA及Dox组与其他各组相比差异有统计学意义（P＜0.01），说明两者可以发挥协同抑制细胞增殖作用，并有一定的时效和量效性。结论成功制备功能化氧化石墨烯载hTERT siRNA基因复合物转染宫颈癌Hela细胞；该复合物可以抑制细胞增殖、抑制细胞中hTERT mRNA及蛋白水平的表达；功能化氧化石墨烯共载hTERTsiRNA及阿霉素可以发挥协同抑制细胞增殖作用。