研究背景:膀胱尿路上皮癌是泌尿系统最常见的恶性肿瘤之一,严重影响人类的生命健康。目前,膀胱癌的治疗方式主要是手术治疗,同时辅以化疗,包括膀胱内灌注化疗、根治手术术前化疗和术后辅助系统化疗。其中,以顺铂为基础的化疗是膀胱癌的主要治疗方案。但是化疗药物耐受是导致肿瘤患者不良预后的重要原因之一。然而,除了之前有文章报道炎症因子激活可能是导致肿瘤的耐药与复发的重要原因之外,对于获得性化疗耐药的机制仍不清楚,因此我们使用顺铂构建膀胱癌耐受细胞株,从而检测耐药细胞株中炎症相关信号通路的表达,拟探讨一种多药制剂Zyflamend对膀胱癌顺铂耐药细胞的潜在影响。研究方法:首先,使用顺铂构建膀胱癌耐药细胞株(T24R)作为实验对象。设立顺铂浓度梯度,使用其培养膀胱癌细胞10个月后,通过MTT实验验证T24R细胞株的耐药性,再通过Western Blot检测耐药细胞株中细胞增殖和NFκ B信号通路相关基因的表达。其次,使用不同浓度的Zyflamend处理这些细胞,检测细胞增殖和NFκB信号通路的活性。随后,为了检测Zyflamend和顺铂之间的协同效应,我们使用顺铂和Zyflamend单独或联合处理T24R细胞株,使用Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡效应,使用Western Blot检测细胞周期和抗凋亡相关蛋白的表达水平。最后,使用顺铂和Zyflamend单独或联合治疗异种移植T24R细胞株的裸鼠,并测量肿瘤组织的大小和重量,同时收集小鼠的肿瘤组织样品并通过免疫组化检测细胞增殖和凋亡的指标。研究结果:与亲代T24细胞株相比,NF κ B信号通路在顺铂耐药的T24R细胞株中激活。在表型上,Zyflamend能够以浓度依赖性抑制T24、T24R以及另一种膀胱癌细胞株J82的增殖。在机制上,Zyflamend能够抑制NFκB介导的细胞增殖、存活和侵袭,并诱导细胞凋亡。此外,Zyflamend能够显著性增加T24R和J82细胞株对顺铂治疗的敏感性。在体外,T24R细胞株构建的裸鼠异种移植瘤模型也证实了这些结果。Zyflamend和顺铂联合处理后,肿瘤体积减小,细胞增殖减少,RelA及其下游靶蛋白MMP9的表达水平降低。研究结论:我们的研究结果表明,顺铂获得性耐药的膀胱癌细胞株会激活NFκB信号通路。Zyflamend可以通过靶向NF κB信号通路抑制细胞增殖和诱导凋亡,治疗膀胱癌的顺铂耐药。