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目的:观察乙状结肠代阴道成形术后人工阴道pH值、黏膜组织形态学改变、黏膜上皮细胞间紧密连接(TJs)的变化及黏膜中闭锁蛋白(Occludin)、带状闭合蛋白-1(ZO-1)和神经型一氧化氮合酶(nNOS)的表达变化,探讨移位的乙状结肠在局部防御功能方面所发生的改变。方法:在2005年10月~2007年10月随访到的在河北医科大学第二医院接受过乙状结肠人工阴道成形术的患者中选取研究对象,在获得医院伦理委员会同意,并取得患者的知情同意后,有15例患者自愿参加本项研究,作为研究组。对随访的患者用自制问卷调查其性生活情况,并通过物理检查了解人工阴道的解剖及功能状况。用精密pH试纸测定研究组人工阴道的pH值。在研究组的人工阴道上段(阴道上1/3)及下段(距阴道口约3cm处)分别活检留取移位的乙状结肠黏膜标本。取同期行乙状结肠人工阴道成形术时患者的正常乙状结肠断端黏膜作为对照组。标本经HE染色后在光镜下观察成形术后移位的乙状结肠黏膜所发生的形态学改变。同时在研究组人工阴道上、下段及对照组标本中各随机选取5例样本,进行电镜观察。采用免疫组化法检测研究组及对照组标本中Occludin、ZO-1及nNOS的表达情况。使用SASv6.12统计软件进行分析,计量资料用均数±标准差(±s)表示,采用t检验;等级资料采用秩和检验。P<0.05认为差异有显著性。结果:1一般情况:80%的被随访者对人工阴道的外观感到满意,术后人工阴道分泌物开始减少的时间为术后第7.50±2.43(4~12)个月;有性生活者术后性生活史平均长18.27±13.52(1~38)个月,其中50%对性生活表示满意。乙状结肠人工阴道外口与正常阴道相似,阴道深度平均为8~12cm,宽度为3~4cm,阴道黏膜湿润,柔软,富有弹性。研究组标本取材时间为术后19.80±14.74(6~48)个月。研究组人工阴道pH值平均为7.79±0.39,与自然阴道相比,明显偏碱性(P<0.01)。2病理学检查结果:光镜下观察研究组人工阴道上段黏膜上皮无明显变化,黏膜肌层肥厚增生。15例人工阴道下段黏膜中有10例(76.7%)发生鳞状上皮化生;黏膜腺体数量明显减少并萎缩,间质成分增多,黏膜肌层及黏膜下层变薄或消失。3透射电镜检查结果:对照组正常乙状结肠微绒毛、细胞器及细胞间TJs未见异常。研究组人工阴道黏膜上皮吸收细胞微绒毛变细,排列稀疏;吸收细胞和杯状细胞内均可见线粒体的部分嵴和膜融合或消失,粗面内质网轻度扩张,有脱颗粒现象;黏膜上皮细胞间TJs变得短而宽,甚至发生断裂,其数量减少或消失。4 Occludin及ZO-1的表达变化:在对照组,紧密连接蛋白Occludin和ZO-1主要沿肠黏膜上皮细胞连接处的顶端均匀地连续分布。研究组人工阴道上段黏膜中Occludin和ZO-1表达不规则,其表达均弱于人工阴道下段发生鳞状上皮化生的黏膜,差异有显著性(P<0.05);与对照组正常乙状结肠相比,差异有显著性(P<0.01)。在研究组人工阴道下段黏膜中,Occludin和ZO-1在未发生鳞状上皮化生的乙状结肠黏膜中表达间断、不均匀,均弱于发生鳞状上皮化生的黏膜及对照组,差异有显著性(P<0.05);但与人工阴道上段黏膜相比,差异无显著性(P>0.05)。在已发生鳞状上皮化生的人工阴道下段黏膜中,Occludin和ZO-1呈阳性线状表达,与对照组相比,差异无显著性(P>0.05)。5 nNOS的表达变化:研究组人工阴道上段黏膜中nNOS呈阳性表达,弱于对照组,差异有显著性(P<0.05)。在未发生鳞状上皮化生的人工阴道下段黏膜中nNOS表达呈阳性,弱于对照组(P<0.05);但与人工阴道上段黏膜相比,差异无显著性(P>0.05)。结论:1患者对乙状结肠法形成的人工阴道其外观和性生活的满意度较高,乙状结肠人工阴道成形术是一种较为理想的术式。2乙状结肠代阴道成形术后人工阴道pH值仍呈碱性改变,介于正常乙状结肠和自然阴道之间;移位后乙状结肠黏膜分泌功能退化,细胞间紧密连接减少,是其局部防御功能下降的体现。3人工阴道上段黏膜及下段未发生鳞状上皮化生的黏膜中Occludin及ZO-1表达减弱,也是移位后的乙状结肠黏膜机械屏障作用减弱的表现。4人工阴道下段黏膜大部分发生鳞状上皮化生,可能是乙状结肠移位后随其功能改变而发生的适应性形态学变化。化生的鳞状上皮中Occludin及ZO-1的表达与原位的乙状结肠黏膜表达相似,说明移位后的乙状结肠黏膜发生了鳞状上皮化生的适应性改变后,其防御功能也再次得到了加强。5乙状结肠人工阴道黏膜中nNOS表达减少可能与人工阴道分泌物的逐渐减少及黏膜局部防御功能的适应性改变有关。