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O-抗原位于细菌表面，是位于革兰氏阴性菌表面的脂多糖的重要组成部分，由多个寡糖单位组成，由于长期受到来自宿主的选择压力，具有非常丰富的多样性。其中的基因可以被分为三类:单糖合成酶基因、糖基转移酶基因和寡糖单位处理酶基因。其中，大部分的糖基转移酶(GTs)的功能没有被鉴定和表征。本文利用生物化学方法表征了两种大肠杆菌O-抗原基因簇中编码的糖基转移酶的功能。 在实验室通过生物信息学预测大肠杆菌O114基因簇中wbuP基因编码半乳糖基转移酶的基础之上，本研究首先构建含有目的酶基因片段的克隆表达载体，再对WbuP融合蛋白诱导表达后，用含有WbuP的细胞粗提液与供体底物UDP-Gal和受体底物GlcNAca-PP-(CH2)11-PhU进行酶活反应，进而利用一级质谱与二级质谱、特异性糖苷外切酶与质谱结合的方法对酶活产物、催化产物的连接顺序与异头碳的构型进行了定性分析;对影响酶活反应的各因素（反应时间、反应温度、pH值、离子、离子去垢剂等）进行了定量分析;最后通过对酶活性追踪后确定了WbuP的亚细胞定位，结合NTA树脂纯化柱对该蛋白进行纯化，并得到了具有活性的纯化后的糖基转移酶。本工作鉴定了WbuP糖基转移酶的功能，并且对其酶的基本性质进行了研究。此外，利用MALDI-TOF-MS检测技术对大肠杆菌O147中糖基转移酶基因wfbZ的糖基转移酶功能进行了初步表征。