目的:建立麻黄附子细辛汤不同配伍组方中各成分的分析方法,为后期主要有效化学成分的透皮吸收研究提供方法;通过对不同配伍组方及提取物基本理化性质的考察,进一步为经皮给药及制剂开发提供依据;运用Franz体外扩散池法,考察不同配伍组方对经皮渗透特性影响,探讨外用中药配伍经皮给药的合理性。方法:(1)采用HPLC法,分别建立麻黄附子细辛汤不同配伍组方中麻黄类生物碱(麻黄碱、伪麻黄碱)、附子类生物碱(苯甲酰新乌头碱、苯甲酰次乌头碱、苯甲酰乌头碱)和细辛挥发油类成分(甲基丁香酚、细辛脂素)的分析方法,并对线性范围、精密度、稳定性、重复性和加样回收率等进行了考察。(2)采用沉淀法和指标成分法测定麻黄附子提取物、附子提取物及其成分的平衡溶解度,采用摇瓶法测定不同配伍组方提取物在正辛醇-水系统中表观油水分配系数。(3)采用体外Franz扩散池法,测定麻黄附子细辛汤不同配伍组方中麻黄类生物碱、附子类单酯型生物碱、甲基丁香酚及细辛脂素的体外经皮渗透速率和12h累积渗透量,运用SPSS17.0软件对结果进行统计学分析,得到麻黄附子细辛汤中不同组方配伍对经皮渗透特性产生的影响。结果:(1)建立的麻黄碱、伪麻黄碱HPLC分析方法为:色谱柱为DiamonsilC18(5μm,250 mm×4.6 mm);流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(2:98,每100ml中加入0.04ml三乙胺);检测波长为190nm;流速为1ml/min;柱温为30℃;进样量为10μl。建立的附子类单酯型生物碱HPLC分析方法为:色谱柱为DiamonsilC18(5 μm,250mm×4.6mm);流动相为 B乙腈-四氢呋喃(25:15)-A 0.1mol/l醋酸铵溶液(每1000ml中加入0.5ml冰醋酸);0-48min B(15%-24%);检测波长245nm,流速为1ml/min,柱温:30℃;进样量为10腈l。建立的甲基于香酚、细辛脂素HPLC分析方法为:色谱柱为DiamonsilC18(5μm,250 mm×4.6 mm);流动相为乙腈-水(60:40);柱温:40℃;检测波长287nm;进样量为10μl。(2)麻黄碱在水中的平衡溶解度为275.19μg/ml,伪麻黄碱在水中的平衡溶解度为132.31μg/ml,指标成分在pH=7.4PBS缓冲液中的溶解度最大,分别为344.27μg/ml和162.22μg/ml。麻黄供试品中麻黄碱和伪麻黄碱的正辛醇/水分配系数分别为53.85(logP=1.73)、19.38(logP=-0.99),麻黄附子供试品中的正辛醇/水分配系数分别为0.101(logP=-0.99)、0.076(logP=-1.12),麻细供试品中的正辛醇/水分配系数分别为2.91(logP=0.46)、3.43(logP=0.54),全方供试品中的正辛醇/水分配系数分别为5.59(logP=0.75)、5.98(logP=0.78)。苯甲酰新乌头碱、苯甲酰次乌头碱、苯甲酰乌头碱在水中的平衡溶解度为11.Oμg/ml、2.07μg/ml、4.36μg/ml,在 PBS 缓冲液中的溶解度在 pH=7.4 时有较大值。附子供试品中苯甲酰新乌头碱、苯甲酰次乌头碱、苯甲酰乌头碱的正辛醇/水分配系数分别为 0.022(logP=-1.65)、0.091(logP=-1.04)、0.094(logP=-1.03),麻黄附子供试品中的正辛醇/水分配系数分别为0.021(logP=-1.68)、0.09(logP=-1.05)、0.094(logP=-1.03),附细供试品中的正辛醇/水分配系数分别为0.037(logP=-1.43)、0.095(logP=-1.02)、0.097(logP=-1.01),全方供试品中的正辛醇/水分配系数分别为 0.024(logP=-1.62)、0.09(logP=-1.05)、0.094(logP=-1.03)。细辛供试品中甲基丁香酚、细辛脂素的正辛醇/水分配系数分别为0.94(logP=-0.027)、1.02(logP=0.009),麻细供试品中的正辛醇/水分配系数分别为0.027(logP=-1.57)、0.172(logP=-0.77),附细供试品中正辛醇/水分配系数分别为0.116(logP=-0.94)、0.338(logP=-0.41),全方供试品中的正辛醇/水分配系数分别为0.118(logP=-0.93)、0.383(logP=-0.42)。(3)不同配伍组方对麻黄碱和伪麻黄碱体外透皮影响:全方组的透皮速率(68.864μg-cm-2 h-1、28.088μg·cm-2·h-1)和 12h 累积渗透量(820.8μg·cm-2、335.4μg·cm-2)均大于其他配伍组,差异极其显著。各配伍组透皮速率和12h累积渗透量由高到低依次为全方组>麻细组>麻黄单味组>麻附组。不同配伍组方对苯甲酰新乌头碱、苯甲酰次乌头碱、苯甲酰乌头碱体外透皮影响:附细组中苯甲酰新乌头碱透皮速率和12h累积渗透量(7.122μg·cm2-2·h-1、88.μg·cm-2)大于附子单味组、麻附组、全方组,附细组中苯甲酰次乌头碱透皮速率和12h累积渗透量大于附子单味组、麻附组、全方组,附细组中苯甲酰乌头碱透皮速率大于附子单味组、麻附组、全方组,全方组、麻附组的透皮速率及12h累积渗透量都低于附细组、单味附子组,麻附组与全方组相比,苯甲酰新乌头碱、苯甲酰次乌头碱、苯甲酰乌头碱的透皮速率和12h累积渗透量无显著性差异。不同配伍组方对甲基丁香酚和细辛脂素体外透皮影响:单味细辛组中甲基丁香酚的透皮速率和12h累积渗透量为76.391μg·cm-2·h-1、788.6μg·cm-2,均显著大于麻细组、附细组、全方组,差异显著。全方组与附细组相比,甲基丁香酚的透皮速率和12h累积渗透量无显著性差异。全方组与麻细组、附细组、细辛单味药组相比,细辛脂素的透皮速率和12h累积渗透量均无显著性差异。结论:本文建立了麻黄附子细辛汤不同配伍组方中各类成分的分析方法,简单准确,重复性可靠。麻黄碱、伪麻黄碱、附子类单酯型生物碱水溶性较好;麻黄类生物碱、附子类生物碱、细辛中甲基丁香酚和细辛脂素均具有较高的生物膜透过性。不同配伍组方对各类成分的经皮渗透作用影响有所差异,油水分配系数数值接近或大于零,药物成分呈现脂溶性,经皮渗透吸收增加。不同配伍组方的理化性质与经皮渗透吸收呈现一定相关性,不同配伍组方油水分配系数的改变,既能促进部分成分的透皮吸收作用,也能降低部分有毒成分的透皮速率和累积渗透量,具有一定的减毒增效优势,证明了外用中药配伍的科学性。