目前研究证实,NF-κB转录因子家族成员参与调控了大量基因的表达,在免疫、炎症反应、细胞生长及凋亡等的信号调节中发挥重要的功能。一旦参与NF-κB信号通路的分子突变或者该通路被异常激活,将会导致慢性炎症、病毒感染性疾病,甚至是癌症等的发生。因此抑制NF-κB信号通路异常激活可以起到抗炎等治疗疾病的目的,事实上,NF-κB信号通路分子已成为治疗上述疾病的重要的靶分子。　　 不同的刺激分子可以通过不同的信号通路激活NF-κB,调控不同的基因表达。正是由于激活NF-κB的信号通路有很多,使得我们可以在不同的层次对该通路进行干预。为了获得新的具有抑制NF-κB信号通路的天然小分子化合物以备选抗炎候选药物研究,本研究使用了LPS刺激的NF-κB-luciferase报告系统为细胞模型,来筛选有抑制NF-κB信号通路活性的候选化合物。在此筛选过程中,我们得到了二萜类化合物lobolide及查尔酮类化合物helichrysetin,这两个化合物能够浓度依赖性的抑制NF-κB的激活(IC50lobolide=4.2±0.29μM及IC50helichrysetin=21.7±2.9μM)。随后,我们以LPS刺激的人外周血单核细胞PBMC及人单核白血病细胞株THP-1细胞为研究对象,发现lobolide及helichrysetin都能够显著抑制NF-κB转录调控的炎症因子TNFa和IL-1β的表达。细胞免疫荧光技术及激光共聚焦分析结果显示,lobolide及helichrysetin干扰了LPS刺激的NF-κB入核行为。　　 为了更好的了解这两个化合物的药理活性机制,我们以LPS刺激的THP-1细胞为研究对象,用蛋白印记的方法检测了TAK1-IKK-NF-κB信号通路的激活。结果表明,lobolide及helichrysetin均能抑制LPS激活的TAK1,IKKα,IKKβ的磷酸化及IκBα的磷酸化降解。在对LPS刺激MAPK激酶激活的信号通路中,我们发现lobolide能够抑制Erk1/2及p38的磷酸化,而helichrysetin却可以促进Erk1/2及p38的磷酸化及血红素加氧酶(hemeoxygenase-1,HO-1)的表达。但是,在小鼠的脓毒症动物模型中,lobolide及helichrysetin均不能抑制小鼠血清中的TNFα的释放。造成实验没有得到与体内一致的结果,最有可能的因为是这两个化合物在溶剂中均呈悬浊液且不稳定,腹腔注射后很快析出,而析出的颗粒不能很好的得到吸收使得化合物不能发挥作用。　　 本研究通过使用细胞模型筛选得到两个具有抑制NF-κB信号通路激活的化合物,lobolide及helichrysetin。首次初步阐述了这两个化合物的药理活性部分是通过抑制NF-κB的入核激活产生的。由于lobolide及helichrysetin通过不同途径能够抑制炎症因子TNFα和IL-1β的释放,提示这两个化合物在结构修饰后很可能成为具有抗炎活性的先导化合物。为我们进一步在基于这两个化合物构效关系研究的基础上发现活性更好的抗炎候选药物研究提供了理论基础。