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固定化技术自问世以来,其应用已涉及食品、化工、医药、化学分析、环境保护和能源开发等诸多领域。但是国内外在固定化水平上存在着较大差异,国外固定化技术已经应用于工业化生产,且部分固定化酶或细胞的运行周期很长。而国内固定化技术起步较晚,采用固定化方法进行生物催化转化的企业为数不多,这是由于单一固定化技术的酶活回收率不高、可反应性差,因此进一步研究固定化技术具有很深远的现实意义。组合固定化技术是在传统固定化技术的基础上通过组合其它固定化技术或者添加某些物质形成组合固定化体系,构造出适合生物活性物质稳定存在的微环境,使处于其中的生物催化剂不受外界环境的影响,最大程度地保持酶原有的结构和功能,长久发挥酶的催化能力,克服单一固定化技术存在的不足,得到高稳定性,高酶活转化率的固定化酶或细胞,应用于工业化生产中。研究首先通过在混合凝胶中加入不同的添加剂和酶保护剂等方法优化卡拉胶固定化凝胶,降低卡拉胶凝胶凝固点,保护酶活力,提高酶活回收率。当卡拉胶与明胶的比例为3.5:0.5,海藻糖的添加量为0.05mol/L以及加入的镁离子浓度为2×10-3mol/L时,将该组合固定化技术应用于L-苯丙氨酸的生产中,结果表明该法显著保护了天冬氨酸转氨酶的活性,提高了酶活回收率,天冬氨酸转氨酶的酶活回收率高达93.6%,凝胶强度达到了约800g/cm2,10批后天冬氨酸转氨酶的活力仍保持在87.8%,最终动力学研究表明反应体系米氏常数Km为0.237mol/L,最大反应速率rmax为47.5×10-3mol/L·g·h,Cpm为0.275mol/L。同时,研究对胶原蛋白膜进行改性,增加膜的耐水性能。结果表明甲醛改性膜的耐水性以及通透性良好,能够替代天然胶原蛋白膜。而卡拉胶与甲醛改性膜的组合固定化技术得到的天冬氨酸转氨酶相对酶活力效果也较优,为82.1%。将甲醛改性膜与100μmol/L 5’-磷酸吡哆醛与卡拉胶直接固定化的颗粒组成的组合固定化技术其天冬氨酸相对转氨酶活力达到了91.3%。非水相体系中,当烯丙醇酮与醋酸乙烯酯的摩尔比值为1:1.2时,温度为40℃,pH值5.5,转速为200r/min,酶量为1.2g,微量水含量为0.025（v/v）,此时