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脂氧酶（LOX）的结构中含有非血红素铁,能专一催化具有cis,cis-1,4-戊二烯结构的多元不饱和脂肪酸加氧形成具有共轭双键的脂肪酸氢过氧化物（HPOD）。本文研究了经溶剂工程改造后优化大豆脂氧酶好氧催化亚油酸的工艺条件,探索反应过程中底物抑制和产物抑制的松弛因子并考察了外源Cu（Ⅱ）与脂氧酶中心Fe（Ⅱ）的相互作用,得出如下主要结论: 1、溶剂DMF的加入可增大底物的溶解性,避免高底物浓度引起的黏度问题,而且可提高底物与酶的互溶性。先用单因素法确定经溶剂工程改造后酶促反应的适宜工艺条件,然后以纯亚油酸（LA）为底物,采用正交法对工艺进一步调优,得到的优化工艺条件为:100C,pH9,氧气流量为15 mL/min,搅拌线速度5.02 m/s,DMF量为4%（V/V）,底物浓度为90-100g/L,酶浓度4.74×105U/mL,阻聚剂浓度为0.02g/L,柠檬酸钠含量为体系的1%。在此条件下,取底物浓度90g/L（有效底物86.40g/L:亚油酸78.30g/L,亚麻酸8.10g/L）,以东北新大豆为酶源时,HPLC分析HPOD结果无原料及副产物峰,该结果与二甲酚橙法测定结果97.0%基本一致,所得13-与9-HPOD异构体的比例为1.9:1。 2、大豆脂氧酶催化亚油酸的氢过氧化反应在底物浓度≥0.075 mmol/L时便产生底物抑制作用。选用logP为-0.81的稀释剂DMF可将底物浓度提升到232 mmol/L并使HPOD产率从38.93%提高到66.09%。冻干实验表明,在底物存在下,DMF对酶几乎无损伤,酶活基本保持不变;对DMF的激活常数Ka、抑制常数Ki及DMF与底物对酶活的综合影响的分析表明,低浓度DMF与自由酶的相互作用为竞争性激活,高浓度时为竞争性抑制。高浓度DMF的底物抑制常数KSS比空白增大了1000～5600倍,说明DMF松弛底物抑制与竞争性抑制脂氧酶的综合作用使得底物抑制作用大大松弛。实验发现DMF浓度为5%的体系具有最大的KSS与Ki值,说明此浓度下DMF对底物抑制作用的松弛效应最强而对酶的抑制作用相对最小。 3、在经溶剂工程（DMF）改造的LOX催化高浓度底物LA的氢过氧化反应体系中,电解质对高浓度底物LA体系的参与机制不能仅用传统的两类位点的竞争机制予以解释,需要综合考虑以下三要素（1）电解质调节两类位点对LA竞争吸附的共性作用;（2）电解质对LOX的共性激活和特性激活作用;（3）电解质微调LOX-LA-DMF结合状态的共性作用等。虽然（1）和（2）的作用随着电解质浓度增加而单调增强,但（3）的作用