论文部分内容阅读
目的导盲犬在培训过程中面临着两大问题:培训成功率低和培训复杂程度高,这两大问题严重影响了导盲犬的发展,致使目前导盲犬数量远远满足不了视力残疾人士的需求。通过在导盲犬培训前期进行有效的筛选,预先筛选出具有能够成为导盲犬潜力的犬只,将能够提高导盲犬培训的成功率,降低培训成本。目前,大多数采用行为测试方法对犬进行甄别,这种方法相对主观性比较强,所得结果不是很准确,而分子遗传是从DNA水平上进行判断,不受其他因素的干扰,更稳定可靠,且实施起来也比较方便。因此本研究以行为测试为基础,选取了与犬行为相关的三个基因:COMT(Catechol-O-methyltransferase,COMT)、SLC1A2(Solute carrier family 1 member 2,SLC1A2)和TH(Tyrosine hydroxylase,TH),从这三个基因中各选取了3个比较重要的SNP位点,并对这9个SNP位点的多态性和拉布拉多犬活跃度行为变量之间的相关性进行研究,旨在为导盲犬的培训建立行为分子遗传标记,以期能降低导盲犬的培训成本,提高培训成功率,能够为导盲犬事业的发展略尽绵薄之力。方法本研究的实验对象由中国大连导盲犬培训基地提供,共选取拉布拉多犬81只(雄:48只,雌:33只)。采用犬活跃度评估测试方法对犬的活跃度进行评估(Dog Activity Assessment,DAA)。采用PCR/测序法对各个SNP位点进行基因型鉴定。用SPSS19.0软件统计分析了这9个SNP位点的基因多态性与犬活跃度行为变量的关联。结果1.性别与活跃度行为变量间的关联性分析这三种基因选取的犬的性别与活跃度行为变量间均没有显著性差异:COMT(F(1,79)<0.71,P>0.05),SLC1A2(F(1,74)<1.95,P>0.05),TH(F(1,63)<2.16,P>0.05)。2.COMT基因SNP位点多态性与活跃度行为变量间的关联性分析COMT基因的c.39A>G、c.216G>A和c.482G>A位点均存在3种基因分型。COMT基因的c.39A>G位点在拉布拉多犬中呈中度多态(0.5>PIC>0.25),而c.216G>A和c.482G>A呈低度多态(PIC<0.25)。COMT基因c.39A>G与社会接触、游戏、追逐和被动行为变量之间差异不显著(F(2,71)<1.26,P>0.05);c.216G>A和c.482G>A位点对四个活跃度行为变量也没有显著影响(F(1,71)<3.57,P>0.05)。这表明COMT基因可能对拉布拉多犬的活跃度没有直接影响。3.SLC1A2基因SNP位点多态性与活跃度行为变量间的相关性SLC1A2基因3个SNP位点中仅c.471T>C位点存在多态性。SLC1A2基因的c.471T>C位点在拉布拉多犬中呈中度多态(0.5>PIC>0.25)。SLC1A2基因的c.471T>C位点与社会接触、游戏、追逐和被动行为变量之间差异都不显著(F(1,71)<3.57,P>0.05)。4.TH基因SNP位点多态性与活跃度行为变量之间的关联性分析TH基因3个SNP位点中,c.168C>T和c.180C>T位点仅有2种基因分型,在拉布拉多犬中呈低度多态(PIC<0.25),对活跃度行为变量没有显著影响(F(1,58)<0.88,P>0.05)。而c.264G>A位点存在3种基因型,呈中度多态(0.5>PIC>0.25)。c.264G>A位点的多态性与社会接触、游戏和被动行为变量之间不存在显著性差异(F(2,58)<1.40,P>0.05),但与追逐测试之间差异显著(F(2,58)=5.186,P=0.008<0.05),且对追逐测试中的抓取反应影响及其显著(P=0.02<0.05)。结论COMT、SLC1A2和TH基因中选取的SNP位点的多态性可能对拉布拉多犬的活跃度行为没有显著影响。只有TH基因的c.264G>A位点与追逐行为中的抓取反应间存在极显著差异,提示TH基因可能对犬的衔取行为有一定的影响,可作为导盲犬以及其他工作犬早期鉴定的有效遗传分子标记。