【摘 要】
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目的1.探讨粒细胞集落刺激因子（G-CSF）对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（HIBD）模型的神经保护作用;2.分析2种NF-κB因子（p65和c-Rel）在新生大鼠HIBD模型及使用G-CSF干预后的变化情况,探讨NF-κB信号通路在G-CSF对HIBD的神经保护效应中所起到的作用。方法将54只7日龄新生SD大鼠随机分为三组:假手术组（Sham组）,缺氧缺血脑损伤组（HIBD组）及G-CSF治疗组（G
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目的1.探讨粒细胞集落刺激因子（G-CSF）对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（HIBD）模型的神经保护作用;2.分析2种NF-κB因子（p65和c-Rel）在新生大鼠HIBD模型及使用G-CSF干预后的变化情况,探讨NF-κB信号通路在G-CSF对HIBD的神经保护效应中所起到的作用。方法将54只7日龄新生SD大鼠随机分为三组:假手术组（Sham组）,缺氧缺血脑损伤组（HIBD组）及G-CSF治疗组（G-CSF组）,每组18只。后两组采用Rice法建立HIBD模型,Sham组则不予结扎动脉和缺氧,G-CSF组在造模后1小时、24小时给予腹腔注射G-CSF 50 μg/kg,Sham组和HIBD组给予等体积生理盐水腹腔注射。造模48小时后进行体重测量;神经行为测试:Longa评分、Grip test、悬吊试验;TTC（2,3,5—氯化三苯基四氮唑）染色评价脑梗死面积;尼氏染色观察海马及皮质区神经细胞损害情况;免疫组化法评定p65和c-Rel的核转移情况;检测损伤侧脑组织MDA、SOD活性;免疫印迹法（WB）检测脑组织CC-3,Bcl-2蛋白水平变化。结果1.体重增长:Sham组体重增长量明显高于HIBD组和G-CSF组（均P<0.05）,而HIBD组与G-CSF组之间体重增长差异没有统计学意义（P>0.05）。2.神经行为测试:Longa评分和Grip test方面,Sham组和G-CSF组的明显优于HIBD组（均P<0.05）,而Sham组与G-CSF组差异没有统计学意义（P>0.05）。Sham组悬吊时间明显较HIBD组和G-CSF组长（均P<0.05）,G-CSF组悬吊时间长于HIBD组（P<0.05）。3.脑梗死面积:HIBD组和G-CSF组脑梗死面积百分比明显高于Sham组（均P<0.05）,G-CSF组较HIBD组脑梗死面积百分比有所下降（P<0.05）。4.Nissl染色病理改变:相较于Sham组,HIBD组和G-CSF组神经元数量明显减少,胞体缩小而变形,尼氏体数量减少,部分细胞胞核固缩、碎裂或溶解。相较于HIBD组,G-CSF组海马CA1区和皮质区神经元数量更多,胞体及胞核形态更规整,尼氏体增多。5.p65及c-Rel核转移率:p65:Sham组p65核转移率明显低于HIBD组和G-CSF组（均P<0.05）;相较于HIBD组,G-CSF组p65核转移率降低（P<0.05）。c-Rel:Sham组c-Rel核转移率明显低于HIBD组和G-CSF组（均P<0.05）;相较于HIBD组,G-CSF组c-Rel核转移率升高（P<0.05）。6.氧化应激:与Sham组相比,HIBD组和G-CSF组右侧脑组织MDA含量明显升高而SOD活性明显下降（均P<0.05）,与HIBD组相比,G-CSF组MDA含量下降,SOD活性升高（均P<0.05）。7.凋亡相关蛋白:相较于Sham组,HIBD组和G-CSF组CC3表达量明显升高,Bcl-2表达量明显下降（均P<0.05）,与HIBD组相比,G-CSF组CC3表达量有所下降,Bcl-2表达量有所上升（P<0.05）。结论1.G-CSF对新生大鼠HIBD具有神经保护作用;2.p65和c-Rel在HIBD模型脑组织中均发生明显激活,G-CSF可能部分过降低p65、提高c-Rel转录活性发挥对HIBD的神经保护作用;3.p65和c-Rel在HIBD中的作用方向可能相反。
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