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本文分三个部分进行探讨。 第一部：SD大鼠睾丸匀浆和血清中的哇巴因浓度的比较 目的：比较SD大鼠的睾丸匀浆和血清中的哇巴因浓度。 方法：健康SD大鼠38只，体重200±20g，采用心脏采血获取血清同时获取双侧睾丸组织，并使用0.01mol/L的PBS进行睾丸匀浆获取匀浆上清液。使用大鼠EO ELISA试剂盒检测大鼠血清和睾丸匀浆中的哇巴因浓度。采用配对样本t检验比较睾丸匀浆和血清中的哇巴因浓度。 结果：大鼠血清中的哇巴因浓度为（1.88±0.63）ng/ml，睾丸匀浆中的哇巴因浓度为（2.56±0.53）ng/ml，经配对样本t检验，SD大鼠睾丸匀浆中的哇巴因浓度要明显高于血清中的哇巴因浓度（P<0.01）。 结论：SD大鼠睾丸匀浆中的哇巴因浓度要明显高于血清中的哇巴因浓度，说明睾丸组织中可能存在分泌哇巴因的细胞。 第二部分：精液参数正常男性精浆和血清中的哇巴因浓度的比较 目的：比较正常男性精浆和血清中的哇巴因水平。 方法：按照人类精液检验与处理实验室手册第五版中关于正常精液质量的标准来收集27份正常精液参数的精液，并同时采集受试者的静脉血5ml，分别获取精浆和血清。采用人EO ELISA试剂盒检测精浆和血清中的哇巴因水平。采用配对样本t检验比较精浆和血清中的哇巴因浓度。 结果：正常精液参数的精浆中的哇巴因水平（2.69±0.23）ng/ml，血清中的哇巴因水平（2.41±0.17）ng/ml，经配对样本t检验，正常精液参数的精浆中的哇巴因浓度要明显高于血清中的哇巴因浓度（P<0.01）。 结论：正常精液参数的精浆中的哇巴因水平要高于血清中的哇巴因水平，说明精子所在的生精小管内的哇巴因浓度要高于血清中哇巴因浓度。 第三部分：睾丸间质细胞分泌哇巴因的探索性研究 目的：通过原代培养获取SD大鼠睾丸间质细胞，采用无血清培养基培养睾丸间质细胞，并在黄体酮的作用下检测细胞上清液中的哇巴因浓度。 方法：选择200±20g的SD雄性大鼠3只，采用胶原酶I消化法、percoll密度梯度离心法消化并提纯睾丸间质细胞，采用3β-HSD染色法鉴定细胞的纯度。细胞经过换液传代4-5次，细胞的纯度和活力都达到最佳，细胞在无血清培养基中饥饿12h后，再在无血清的培养基和不同浓度的黄体酮的刺激下培养24h，检测细胞上清液中的哇巴因浓度。 结果：经过胶原酶I消化、percoll密度梯度离心获取的睾丸间质细胞，经过培养传代4-5次后细胞的纯度达到90％以上。在不同浓度的黄体酮刺激下，细胞上清液中检测到一定浓度的哇巴因。 结论：睾丸间质细胞能够在黄体酮的刺激下分泌一定浓度的哇巴因。