透明质酸靶向姜黄素壳聚糖纳米粒的制备及初步细胞学研究

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目的制备透明质酸靶向姜黄素壳聚糖纳米粒,并对其特性进行考察;以A549细胞和HepG2细胞为模型细胞,进行MTT实验,考察其体外的细胞毒性作用。方法1本实验以姜黄素为抗肿瘤模型药物,利用壳聚糖的游离氨基与多聚磷酸钠的阴离子发生离子交联反应而制得纳米粒,然后将透明质酸与壳聚糖通过共价键连接,制备透明质酸靶向姜黄素壳聚糖纳米粒。2将透明质酸靶向姜黄素壳聚糖纳米粒作用于透明质酸受体CD44高表达的A549细胞,以CD44低表达的HepG2细胞为对照,采用MTT法考察其对两种细胞的细胞毒性,初步评价透明质酸靶向姜黄素壳聚糖纳米粒的靶向性。结果制备HA-CUR-CS-NPs的最佳处方为:CS浓度为2.5mg·mL-1、TPP浓度为2.0mg·mL-1、CS与TPP质量比4.5:1、投药量为5mg,HA与CUR-CS-NPs的最佳比例为3:1。在此条件下,HA-CUR-CS-NPs平均包封率为为42.73±0.30%,平均载药率为28.44±0.12%,HA平均结合率为38.97±0.53%。CUR-CS-NPs和HA-CUR-CS-NPs平均粒径分别为143.9nm和205.3nm,透射电镜下,HA-CUR-CS-NPs形态规则,粒径分布均匀,傅里叶红外光谱仪检测,确定HA-CUR-CS-NPs的结构。MTT实验结果为,对HA受体高表达的A549细胞而言,CUR-CS-NPs和HA-CUR-CS-NPs抑制率都高于CUR,且后者高于前者;对HA受体低表达的HepG2细胞而言,CUR-CS-NPs和HA-CUR-CS-NPs抑制率都高于CUR,且两者抑制率基本相同。结论本文采用离子交联法制备HA-CUR-CS-NPs,方法简便可行。体外释放实验结果表明,HA-CUR-CS-NPs的缓释效果最好。MTT实验结果为,HA-CUR-CS-NPs对HA受体高表达的A549细胞的增殖抑制作用最高。以HA为靶头制备的HA-CUR-CS-NPs可将CUR递送至靶点,明显提高CUR对肿瘤细胞的增殖抑制作用,有望成为一种理想的肿瘤靶向药物载体。
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