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桑树病害种类很多,发生条件各异,症状也不相同，通常将桑树病害分为桑病毒病,桑真菌病和桑细菌病。而桑树根部病害主要有桑真菌病，桑细菌病和桑根结线虫病。目前,发现对桑树具有致病性的真菌有:桑蜜环菌属（Armillaria）、裂褶菌属（Schizophyllum）、桑卷担菌属（Helicobasidium）、根霉属（Rhizopus）和镰霉菌属（Fusarium）。本研究从一株桑树根部分离获得对桑树具有致病性的菌株，暂命名为TY.GF1。在32℃，该菌在PDA培养基上首先长出白色气生菌丝，呈棉絮状，菌落无定形，随后菌落转为灰黑色，病原菌2～3d内长满整个平板。培养3d后观察病原菌产生小刺球形孢子囊，有假根,孢子囊球形或近球形，深褐色，孢囊孢子呈卵形或球形或近似球形，大小不等，淡褐色。同时应用核糖体18S rDNA和ITS区基因分子方法进一步鉴定。利用真菌通用引物扩增了出18S rDNA和ITS区基因片段，经测序，大小分别为1805bp和627bp。将获得的基因序列分别提交到GenBank数据库，并在NCBI中blast，选取同源性较高的序列构建系统进化发育树。结合形态特征和基因序列分析，将TY.GF1菌株鉴定为米根霉。通过罗丹明B平板对米根霉的发酵液的快速鉴定，确定TY.GF1野生菌株能够产生脂肪酶。本研究通过不同碳源（葡萄糖、麸皮、果糖、红糖、蔗糖、桑粉、淀粉、麦芽糖和大豆油）、氮源（蛋白胨、酵母膏、牛肉膏、硝酸钠、玉米粉和硫酸铵）、诱导物（大豆油、麻油、蓖麻油、橄榄油、芥花籽油、葵花籽油、蚕蛹油和菜籽油）、温度（25～45℃）、pH值（4～9）、产酶时间（12～96h）、表面活性剂（曲拉通X-100、吐温-20、吐温-80、聚丙二醇和十二烷基硫酸钠）的单因素筛选，选取8个可疑因素利用Placket-Burman作重要因素筛选，确定了麦芽糖、蛋白胨和芥花籽油为对全细胞酶活影响较大的重要因素，并用Box-Behnken确定各因素最佳响应值，得出最适反应体系为：麦芽糖2.08g/L,蛋白胨21.58g/L，芥花籽油12.73g/L，吐温-800.1%（v/v），NaNO31.2g/L，KH2PO41.2g/L，MgSO47H20，温度35℃，摇床转速130rpm。在该条件下，全细胞最大酶活预测值为278.154U/g，验证值为272.5U/g。对脂肪酶的前提基因和成熟基因进行了扩增和测序,分别获得了片段长度为1101bp和810bp的片段,将获得的前体序列提交到GeneBank，登录号为JN689988。序列分析表明，无内含子，分别编码366个氨基酸和269个氨基酸，成熟脂肪酶的结构域在SDGGKVVAAT序列上。理化性质预测分析表明，成熟脂肪酶的分子式为C1335H2056N350O396S7，分子量为29569.5，理论等电点为8.14，消光系数为1.163～1.175；发现前体脂肪酶的分子式为C1758H2729N469O547S10，分子量为39507.4，理论等电点为7.15，消光系数为1.123～1.132。且二者都是疏水的。在叔丁醇介质体系下，TY.GF1全细胞催化蚕蛹油制备生物柴油最佳反应条件为35℃，转速为130rpm，蚕蛹油6.5g，全细胞添加量为0.8g，水含量为油重的3%，甲醇1.05g，叔丁醇体积比为1.5:1，反应24h后，生物柴油得率可达到80%以上。在无助溶剂反应体系中，虽然采用了分步添加甲醇的方式来避免甲醇对全细胞的负面影响，但全细胞在重复使用过程中稳定性较差，在第五次的时候，全细胞酶失活，而在叔丁醇介质体系中，反应九次之后，全细胞相对酶活力仍然能达到67%。