人胃癌细胞环氧合酶-2表达的蛋白质组双向凝胶电泳分析

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环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)在多数胃癌组织及细胞系中表达异常增高,而抑制COX-2的活性可使胃癌细胞的增殖受抑制,凋亡增加。这提示COX-2在胃癌的发生中起重要作用,但其机制不详。蛋白质组学研究能够全貌性对比不同COX-2表达水平细胞的蛋白质表达差异,是查找特征性功能蛋白质和标志物的有力手段。本研究建立和优化胃癌蛋白质组研究的方法系统,分析人胃癌细胞SGC7901-asCOX2及SGC7901-pcDNA(用COX-2反义重组质粒及空载体分别转染胃癌细胞系SGC7901得到的两个细胞系)表达的蛋白质组,建立两者之间的差异表达谱并寻找两者之间的差异蛋白。主要实验方法及结果包括: 1、通过固相pH梯度等电聚焦凝胶电泳(第一向)技术将已经提取好的SGC7901-asCOX2及SGC7901-pcDNA细胞总蛋白进行初步分离。第一向等电聚焦凝胶电泳根据不同蛋白质分子所带电荷量的差异将不同等电点的蛋白质在胶条上进行水平分离。 2、通过SDS聚丙烦酰胺凝胶电泳(第二向)方法将平衡后的第一向胶条进行分离,第二向SDS聚丙烦酰胺凝胶电泳根据蛋白质分子质量的不同将蛋白质进
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