水生植物内生菌的分离及其溶藻特征

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目前水体富营养化而引起严重的水华现象致使水环境污染加剧,探索行之有效的溶藻方法控制和治理水华显得尤为迫切。传统的物理、化学方法除藻具有其局限性,花费人力物力大,治藻同时常会对水体造成污染。利用微生物在治理水华方面具有很大潜力和应用前景。水生植物内部广泛的存在大量的内生菌,而利用内生菌作为生防因子是近年来研究的热点。本文采用取自长春农大蓝湖生长的水生植物,培养并进行多次植物内生菌的分离,通过对比分析选定的植物表面消毒试剂对供试植物不同消毒时长消毒后的效果,选定最佳的消毒时长,确保植物表面消毒彻底,能够分离培养的内生菌来自植物内部,并成功分离出一株具有溶藻效果的溶藻细菌,具体的研究内容如下:(1)对供试水生植物组织表面消毒时间的确定:用75%、0.2%升汞、5%次氯酸钠为消毒试剂分别通过试验对供试水生植物单一进行表面消毒并分析结果分别确定三种消毒试剂的对供试水生植物的消毒时长。(2)分离出了来自植物内部的四株植物内生菌(E1,E2,E3,E4)并对其进行溶藻试验筛选出了一株具有溶藻效果的溶藻细菌E1。其中E2,E3为内生细菌,E4为内生真菌。(3)分离纯化溶藻细菌E1并对其在显微镜下进行菌落特征观察和革兰氏染色:其菌落特征为:菌落呈乳白色、圆形、有光泽、边缘整齐,菌落较小。革兰氏染色结果为革兰氏阳性菌,呈杆状。(4)在以牛肉膏蛋白胨培养基25℃条件下经过恒温振荡培养箱培养,通过测量OD600值绘制其生长曲线。(5)不同pH值条件下的生长状况:发现该溶藻菌适宜在中性偏碱性的条件下生长。其适合生长的PH值为6至9,而pH值为5和10时该菌长势较弱,pH值为3和11时基本不长。(6)不同光照条件下的溶藻情况:将接入溶藻菌代谢产物的藻液放置全光照,光循环,黑暗三个条件下,发现黑暗条件下的溶藻效果最好,其次是光循环,然后是全光照。(7)代谢产物不同添加量的溶藻效果:添加不同数量溶藻菌的代谢产物至铜绿微囊藻液中,结果溶藻效果与添加量成正比。(8)在不同碳源为营养源的生长情况:该菌有有很好的利用有机氮的能力,不具备利用无机氮的能力。(9)经过热处理的溶藻菌的代谢产物和未经处理的代谢产物对铜绿微囊藻的溶藻效果情况:两种处理方式对藻的去除率没有太大差别,说明该溶藻菌具有热稳定性。
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