rhIGF-I激活大鼠尿道括约肌原位肌卫星细胞促进肌纤维增生

来源 :温州医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liubin523
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目的:  通过在雄性 SD大鼠尿道壁注射系列不同浓度人重组胰岛素样生长因子-Ⅰ (rhIGF-Ⅰ)蛋白后,观察尿道壁骨骼肌部分原位肌卫星细胞的激活情况及尿道括约肌的功能改变,探讨 rhIGF-Ⅰ在临床压力性尿失禁治疗中的应用前景.  方法:  本实验使用雄性成年 SD大鼠 20只,根据其尿道壁局部注射 rhIGF-Ⅰ浓度的不同,随机分为四组,分别为 20μg/μl组、50μg/μl组、100μg/μl组以及生理盐水组,每组 5只大鼠,其中生理盐水组作为对照.通过动物手术操作,使用微量注射器在各组大鼠局部尿道壁注射不同浓度 rhIGF-Ⅰ.饲养 4周后行肌肉收缩力测定,分析尿道肌肉功能学改变.随后处死大鼠,取 rhIGF-Ⅰ注射部位尿道组织行HE染色观察新生肌纤维,行免疫荧光染色检测肌卫星细胞标志物 c-met蛋白及pax7蛋白,分析肌卫星细胞的激活及增殖情况.  结果:  1.肌肉收缩力测定四组大鼠尿道肌肉收缩力分别为(4.91±2.34)、(6.33± 2.63)、(6.30±1.94)、(6.50±3.24)g;处理组与对照组相比及各处理组之间相比,尿道肌肉收缩力均无明显差异(P值均>0.05).  2. HE染色显示,生理盐水对照组、20μg/μl组、50μg/μl组以及 100μg/μl组尿道注射部位新生肌纤维数分别为(0.82±0.75)、(1.33±0.62)、(2.00±0.74)、(2.67±0.98)个;50μg/μl组及 100μg/μl组新生肌纤维数量显著多于对照组(P<0.001;P<0.001)及 20μg/μl组(P<0.05;P<0.001),20μg/μl组与对照组相比无明显差异(P>0.05).  3.免疫荧光染色显示各组 pax7阳性细胞数量分别为(27.00±2.65)、(37.87 ±9.46)、(61.83±11.66)、(64.27±9.28)个;50μg/μl组和 100μg/μl组其pax7阳性细胞数量显著多于对照组( P<0.001;P<0.001 ) 以及20μg/μl组(P<0.001;P<0.001),50μg/μl组和100μg/μl组之间以及 20μg/μl组与对照组相比,pax7阳性细胞数无明显差异(P>0.05).  4.免疫荧光染色显示 c-met蛋白平均荧光强度分别为(7.41±2.00)、(15.39 ±4.96)、(21.60±4.26)、(24.04±3.13);三个处理组尿道注射部位 c-met平均荧光强度均显著高于对照组(P<0.05;P<0.001;P<0.001,浓度从低至高),其中50μg/μl组和 100μg/μl组平均荧光强度显著高于 20μg/μl组( P<0.001;P<0.001 ) .而50μg/μl组 和100μg/μl组之间无明显差异(P>0.05).  结论:  尿道壁局部注射人重组胰岛素样生长因子-Ⅰ能激活原位肌卫星细胞,促进其增殖分化为新生肌纤维,使尿道括约肌增生肥大.
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