【摘 要】
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VQ模序蛋白是植物中一类高度保守的蛋白质家族,能与WRKY转录因子相互作用,在植物的生长、种子的发育和逆境胁迫应答中具有重要作用。AtARVQ1是拟南芥中34个VQ模序蛋白基因家
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VQ模序蛋白是植物中一类高度保守的蛋白质家族,能与WRKY转录因子相互作用,在植物的生长、种子的发育和逆境胁迫应答中具有重要作用。AtARVQ1是拟南芥中34个VQ模序蛋白基因家族成员之一,参与了拟南芥应答砷酸盐胁迫过程。为探明AtARVQ1是否参与其它逆境胁迫应答过程及其作用机理,本研究构建了组成型启动子CaMV35S驱动AtARVQ1的过量表达载体,利用根癌农杆菌介导转化野生型拟南芥。用NaC、ABA和甘露醇处理过量表达AtARVQ1转基因材料和T-DNA插入AtARVQ1材料(vql2-1和vq12-2)后的萌芽率和NaCI处理过量表达AtARVQ1转基因材料后的根长进行了测定。构建了AtARVQ1与GFP融合表达载体和AtARVQ1启动子(PAtARVQ1)驱动GUS表达载体,转化拟南芥获得了转基因材料。利用这些材料初步分析了AtARVQ1基因的亚细胞定位和组织表达特异性。主要试验结果如下:1.经抗生素筛选,PCR鉴定,GUS染色鉴定和RT-PCR分析获得10个过量表达AtARVQ1转野生型拟南芥株系。2.过量表达AtARVQl转基因拟南芥种子在150mM N aCl胁迫下其萌芽率显著高于对照;各组拟南芥种子在100mM NaCl胁迫下均能萌芽,而200mMNaCl胁迫时未萌芽。3.过量表达AtARVQl转基因拟南芥幼苗主根在100mM NaCl胁迫下长于对照;150mM和200mMNaCl胁迫下幼苗根系不生长。4.过量表达AtARVQl转基因拟南芥种子在0.5μM ABA处理下和200mM甘露醇胁迫时其萌芽率略高于对照;1.5μMABA处理和300mM甘露醇胁迫时种子均不能萌芽。5. vq12-1种子萌芽率在NaCl、ABA和甘露醇胁迫下与野生型拟南芥没有显著差异;而用150mM NaCl、0.5μM ABA或200mM甘露醇胁迫时,vq12-2种子的萌芽率显著性高于野生型。6.激光共聚焦显微镜观察到转35S::AtARVQ1-GFP和PAtARVQ1::AtARVQ1-GFP拟南芥幼苗根细胞中绿色荧光信号强烈,说明融合蛋白均表达。
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