【摘 要】
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印记基因是一类亲本来源特异性表达的基因,大部分印记基因在胚胎发育、胎盘形成以及个体生活过程中扮演着重要角色。P57是周期蛋白激酶抑制剂,是一个典型的抑癌基因,同时也是
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印记基因是一类亲本来源特异性表达的基因,大部分印记基因在胚胎发育、胎盘形成以及个体生活过程中扮演着重要角色。P57是周期蛋白激酶抑制剂,是一个典型的抑癌基因,同时也是一个父本印记、母本表达的印记基因,其缺失会带来胚胎致死。P57免疫荧光染色显示其蛋白在乳腺组织中广泛表达,RT-PCR结果表明它在乳腺形态变化的4个时期中表达量呈下降趋势。为了研究P57在乳腺发育过程中是否起到了作用,本文在乳腺细胞中设计了两种shRNA的对P57进行了敲除,发现P57通过影响乳腺上皮细胞的干性来影响增殖,RT结果显示其干细胞信号通路的相关基因表达水平明显降低,然而周期检测发现其G1期的细胞比例下降。通过对临近LncRNA Kcnq1ot1进行敲除可以使P57的表达量显著上调,但对PRC2复合物成员Suz12敲除虽然可以降低Kcnq1ot1的表达,但P57的变化趋势却不稳定。在对P57进行敲除后,RT检测到另外15个印记基因的表达水平也发生显著变化,验证了乳腺细胞中印记基因网络的存在。
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