绿针假单胞菌XF10对烟草黑胫病菌的拮抗作用研究

来源 :中国农业科学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:riyueshen1969
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由寄生疫霉烟草致病变种[Phytophthora parasitica var.nicotianae(Breda de Haan)Tucker]引起的烟草黑胫病是烟草生产中危害极其严重的一类根茎病。为了丰富烟草黑胫病拮抗细菌菌株资源,有效利用生物防治方法控制烟草黑胫病,在烟草黑胫病发病严重地块的健株根际周围选取土壤样品300份,筛选获得了对烟草黑胫病菌有明显拮抗作用的生防菌株XF10,对该菌株进行鉴定,并就其对烟草黑胫病菌的拮抗作用进行研究,主要研究如下:1.将土壤样品通过平板稀释法、喷施病原指示菌初筛、平板对峙培养复筛等方法获得了CY106、XF10、CY110三株对烟草黑胫病菌有明显拮抗作用的细菌。其中XF10对烟草黑胫病菌的抑制率最高,为83%;盆栽试验结果显示,XF10菌株对烟草黑胫病相对防治效果最好。通过不同菌种保存方法对XF10菌株抑菌活性的影响,确定最佳保存方法为-80℃甘油保存。2.经生理生化特性观察、BIOLOG自动微生物鉴定系统、16S rDNA基因序列分析,结果确定XF10为假单孢菌属绿针假单胞菌(Pseudomonas chlororaphis)。3.通过研究培养时间、温度、pH对XF10菌株的影响,探明XF10菌株最佳培养时间72 h、最适生长温度为31℃、最适pH为7.5。4.XF10菌株的菌悬液以及发酵上清液对烟草黑胫病菌的抑制率均达80%以上。XF10菌株能够抑制烟草黑胫病菌菌丝正常生长,进一步分析结果表明,该菌株能够产生纤维素酶和蛋白酶。5.XF10菌株菌悬液以及发酵上清液对烟草黑胫病菌菌量生长、孢子囊产生、孢子囊释放、游动孢子萌发均能起到很好的抑制作用,其中作用最明显的处理是加入5 mL菌株菌悬液,对菌丝生长量的抑制作用明显;对孢子囊的产生抑制率达95.6%;孢子囊释放最高相对抑制率达86.7%;对游动孢子的萌发也具有一定的抑制作用,放置24 h抑制率为58.2%。6.通过平板对扣法测定XF10菌株挥发性产物对烟草黑胫病菌的抑制作用,结果表明菌株的挥发性代谢产物能有效抑制烟草黑胫病菌生长,抑制率为86%。采用SPME-GCMS法对XF10菌株的挥发性物质进行分析,结果表明总共检测出高匹配度(≥80%)的挥发性产物15种,为烯烃类、酮类、醇类。通过研究不同培养时间与XF10菌株挥发性产物含量的关系得出,在培养6 d时,挥发性产物含量最高。
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