MiR-214靶向作用CTGF/CCN2因子调控细胞纤维化在子宫内膜异位症的体外机制研究

来源 :首都医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:l1076223769
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研究背景:纤维化是子宫内膜异位症(EMs)重要病理改变。目前研究提出这种纤维化可能是造成生育期女性盆腔痛和不孕重要原因。我们前期查阅文献发现,mi R-214与肝纤维化关系密切,可以直接抑制结缔组织生长因子(CTGF),但在EMs中尚无报道。研究目的:在EMs组织和细胞系水平上,探索miR-214与CTGF间的调控机制。研究方法:(1)收集2015年7月至2016年12月间于首都医科大学附属北京妇产医院初治的子宫内膜异位症患者的内膜组织,及同期子宫内膜正常患者的子宫内膜内膜组织做为对照;(2)在异位症组及对照组中,分别采用原位杂交法检测mi R-214、免疫荧光发检测纤维化相关因子CCN2、collagen I及αSMA的表达差异;(3)TGF-β诱导子宫内膜细胞(RL-95细胞系)纤维化作为子宫内膜异位症细胞模型;(4)RT-PCR和免疫组化法检测mi R-214、CCN2、collagen I及αSMA;(5)TGF-β、mi R-214及mi R-214抑制物处理RL-95细胞系,观察纤维化相关因子的变化水平。研究结果:(1)EMs组织中,mi R-214表达显著降低,伴CTGF、αSMA、collagen I升高;(2)TGF-β可诱导RL-95细胞系纤维化,效果显著,并伴mi R-214的表达变化;(3)RL-95细胞系先转染mi R-214拟似物24h后、部分细胞转染mi R-214抑制物12h,以10ng/ml TGF-β1培养36h。CCN2、collagenαI表达被mi R-214显著抑制,并可通过mi R-214抑制物逆转。免疫组化结果与RT-PCR结果一致。研究结论:(1)mi R-214在子宫内膜异位症组织及细胞系中表达显著降低,纤维化相关因子CCN2、collagenαI与子宫内膜异位症密切相关;(2)利用TGF-β可诱导建立子宫内膜异位症模型;(3)mi R-214可抑制细胞纤维化相关因子的表达,并可被miR-214抑制物阻断。
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