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目的本研究应用分子生物学，构建稳定表达人TFPI-2基因的真核表达载体pEGFP-Nl-TFPI-2，将其转染胃肠道间质瘤细胞系GISTs细胞，观察TFPI-2基因在GISTs细胞中的表达情况，利用MTT法测定并比较TFPI-2实验组、对照组和空白组细胞的生长曲线，研究TFPI-2的表达对胃肠道间质瘤细胞增殖抑制的影响。方法1、在GenBank查询TFPI-2基因序列，克隆合成cDNA。2、构建pEGFP-N1-TFPI-2真核表达载体，XhoI/KpnI酶切电泳、基因测序鉴定其正确性，通过脂质体Lipofectamine2000介导转染GISTs细胞。3、RT-PCR法扩增TFPI-2基因、检测转染前后GISTs细胞内TFPI-2基因的mRNA表达。4、Western-blot法检测转染前后GISTs细胞内TFPI-2基因的蛋白表达。5、MTT法检测转染前后GISTs细胞吸光值，绘制细胞生长曲线，检测TFPI-2对GISTs细胞增殖的抑制作用。结果1、成功构建pEGFP-N1-TFPI-2真核表达载体。2、将pEGFP-N1-TFPI-2转染至GISTs细胞后，通过RT-PCR及Westernblot检测，结果显示：GISTs-TFPI-2组的TFPI-2mRNA及蛋白表达量明显高于其他两组，有明显差异(P<0.05)。3、将pEGFP-N1-TFPI-2转染至GISTs细胞后，MTT法绘制生长曲线，结果表明：实验组细胞增殖程度显著减少，与另外两组相比有显著性差异（P<0.05)，空白组与对照组细胞生长迅速，两组之间无显著性差异（P〉0.05)。结论1、脂质体Lipofectamine2000介导的外源性TFPI-2基因可以增加GISTs细胞内TFPI-2基因的表达。2、TFPI-2能显著抑制GISTs细胞的增殖。