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目的：肺癌是严重危害人类健康的恶性肿瘤，在我国发病率和死亡率呈逐年上升趋势，其中80%以上为非小细胞肺癌。虽然手术、化疗和放疗等治疗方法的水平不断提高，但在肺癌中的疗效仍然不能令人满意。近年来，表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂（EGFR-TKI）吉非替尼和厄洛替尼已应用于非小细胞肺癌的临床治疗，并提高了部分患者的生存率。然而，非小细胞肺癌患者对EGFR-TKI产生的原发性及获得性耐药限制了其临床应用，需要探索新的策略或方法来克服这个问题。最近国外有文献报道认为热休克蛋白90（heat shock protein90，HSP90）抑制剂作为多靶点的抗肿瘤药物可以治疗非小细胞肺癌，而对于EGFR-TKI原发性及获得性耐药的不同非小细胞肺癌细胞株，它们是否均具有抗肿瘤活性结论尚未统一。研究表明，HSP90在多种恶性肿瘤中呈高表达状态，并促进细胞的增殖、分化、侵袭和转移。它的“客户蛋白”包括各种信号转导因子，因此抑制HSP90能从多种途径和环节发挥抗肿瘤作用，这为解决非小细胞肺癌患者对TKI的耐药提供了新的思路。目前HSP90抑制剂在治疗恶性肿瘤方面已进入了临床试验并取得了较为满意的结果。HSP90抑制剂17-DMAG是格尔德霉素的衍生物，它比17-AAG具有更强的水溶性和更高的口服生物利用度，在多种恶性肿瘤中已完成了I期临床试验。本研究通过观察17-DMAG对EGFR-TKI分别原发性及获得性耐药的非小细胞肺癌细胞株A549和H1975的作用，旨在探讨它在体外对细胞增殖、凋亡与EGFR蛋白表达的影响及其可能的机制。方法：以不同浓度的17-DMAG分别作用于非小细胞肺癌细胞株A549和H197524、48、72h后，应用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测细胞增殖抑制情况；作用48h后，应用流式细胞术PI单染法检测细胞凋亡，并应用Western blot检测细胞EGFR及HSP90蛋白表达水平。结果：1MTT结果显示，以终浓度0.003、0.03、0.3、3、30μmol/L的17-DAMG作用后，A549细胞24h的抑制率分别为10.51±1.65%、17.60±1.43%、32.32±2.72%、42.58±3.31%、54.49±0.95%，48h的抑制率分别为21.89±1.57%、28.76±3.06%、38.45±1.74%、57.38±1.21%、73.73±2.42%，72h的抑制率分别为29.15±1.19%、38.64±2.31%、60.23±1.26%、78.45±1.34%、88.90±0.89%；H1975细胞24h的抑制率分别为8.75±2.43%、13.50±1.54%、22.71±3.54%、45.21±3.84%、70.51±2.41%，48h的抑制率分别为16.43±2.63%、28.22±2.19%、40.30±5.23%、59.82±2.05%、81.17±5.38%，72h的抑制率分别为28.81±3.06%、39.68±1.05%、56.26±2.50%、75.33±3.08%、90.61±2.51%。17-DMAG在不同药物浓度和不同作用时间对两种细胞的抑制率差异均有显著性（P<0.01），且呈时间和剂量依赖性。2流式细胞术结果显示，A549和H1975细胞空白对照组的凋亡率分别为0.77±0.13%和1.52±0.17%；以终浓度0.003、0.03、0.3、3μmol/L的17-DAMG作用48h后， A549细胞的凋亡率分别为2.13±0.21%、3.32±0.23%、6.43±0.40%、11.73±0.26%；H1975细胞的凋亡率分别为3.19±0.19%、5.95±0.21%、9.83±0.35%、16.88±0.14%。通过单因素方差分析SNK法两两比较显示，A549细胞及H1975细胞不同药物浓度组和空白对照组之间的凋亡率差异均有显著性（P＜0.01），且凋亡率随着药物浓度的增加而逐渐升高，即呈剂量依赖性。3Western blot结果显示，A549细胞空白对照组的EGFR/GADPH及HSP90/GADPH灰度比值分别为0.261±0.070和0.128±0.007，以终浓度0.003、0.03、0.3、3、30μmol/L的17-DAMG作用48小时后，EGFR/GADPH的灰度比值分别为0.249±0.069、0.259±0.090、0.329±0.075、0.228±0.056、0.219±0.030，HSP90/GADPH的灰度比值分别为0.136±0.008、0.122±0.006、0.153±0.034、0.128±0.015、0.118±0.034，EGFR/GADPH及HSP90/GADPH不同药物浓度组和空白对照组之间的灰度比值差异均无显著性（P＞0.05）；H1975细胞空白对照组的EGFR/GADPH及HSP90/GADPH灰度比值分别为1.397±0.005和0.107±0.027，以终浓度0.003、0.03、0.3、3、30μmol/L的17-DAMG作用48小时后， EGFR/GADPH的灰度比值分别为0.978±0.013、0.706±0.007、0.303±0.006、0.101±0.012、0.018±0.003，HSP90/GADPH的灰度比值分别为0.108±0.021、0.100±0.024、0.105±0.024、0.102±0.023、0.093±0.019，HSP90/GADPH不同药物浓度组和空白对照组之间的灰度比值差异均无显著性（P＞0.05），EGFR/GADPH不同药物浓度组和空白对照组之间的灰度比值差异均有显著性（P＜0.01），17-DMAG能下调H1975细胞的EGFR蛋白表达水平，且呈剂量依赖性。结论：HSP90抑制剂17-DMAG在体外对EGFR-TKI原发性及获得性耐药的非小细胞肺癌细胞株A549和H1975均具有抑制增殖作用，且呈剂量和时间依赖性，并促进了细胞凋亡；17-DMAG可以下调突变型EGFR的蛋白表达水平，且呈剂量依赖性，而野生型EGFR的蛋白表达则无明显变化，表明它对两种遗传背景不同的细胞株的作用机制存在差异。本研究为EGFR-TKI耐药的非小细胞肺癌提供了新的治疗策略。