丹黄明目汤对糖尿病视网膜病变激光术后VEGF/PEDF调节机制的研究

来源 :湖南中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mustang2001
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目的:1.建立BN大鼠DR激光术后模型。2.探讨丹黄明目汤对BN大鼠DR激光术后模型干预研究及VEGF/PEDF表达的影响。方法:1.第一部分:建立BN大鼠DR模型并建立DR激光术后模型。随机抽取10只为空白组,剩下大鼠采用40mg · Kg-1 STZ腹腔注射诱导BN大鼠DR模型。当STZ注射后,血糖稳定达到16.7mmol/L及以上,确认建立DM模型。造模3月后,测量体重、血糖,观察晶状体情况,进行FFA检查及P-Selectin、cAMP、cGMP测定,HE染色光镜下观察视网膜组织形态,确认成功建立DR模型。所有DR模型大鼠右眼行氩激光光凝,左眼不行激光光凝。造影1周后行FFA检查。2.第二部分:探讨丹黄明目汤对BN大鼠DR激光术后模型的干预研究。DR激光术后模型建立后,将模型组随机分为B、C、D三组,空白组为A组,每组10只BN大鼠。A组和B组予生理盐水灌胃,C组予羟苯磺酸钙悬浮液灌胃5ml/kg(浓度为100ml含羟苯磺酸钙片1000mg),D组予丹黄明目汤5ml/kg灌胃,均相当于成人等效剂量。灌胃4周后测量BN大鼠的血糖、P-Selectin、cAMP、cGMP,进行FFA检查,并在HE染色后光镜下观察视网膜组织形态学变化,Western blot分别检测VEGF、PEDF的表达。结果:第一部分:1.造模后3月,空白组晶状体未见明显混浊,眼底结构窥得清;而模型组部分大鼠晶状体混浊,眼底窥不清。2.造模后3月,模型组血糖明显高于空白组,P<0.05,差异有统计学意义。3.造模后3月,FFA检查可见模型组眼底有微血管瘤,空白组未见微血管瘤等眼底改变。4.造模后3月,模型组血浆中P-Selectin的含量高于空白组,P<0.05,差异有统计学意义。5.造模后3月,模型组比空白组cAMP、cGMP均高,P<0.05,差异有统计学意义。6.造模后3月,光镜下可见模型组视网膜结构较空白组紊乱。7.DR模型大鼠行激光光凝术后,FFA检查可见激光斑。第二部分:1.灌胃4周后,A组体重比其他三组体重明显要重,差异有统计学意义(P<0.05),B组、C组、D组体重差异无统计学意义(P>0.05)。2.灌胃4周后,A组比其他三组血糖明显要低,P<0.05,差异有统计学意义;B组、C组、D组之间比较,P>0.05,差异无统计学意义。3.灌胃4周后,A组血浆中P-Selectin含量最低,B组血浆中P-Selectin含量最高。A组与B组、C组比较,P<0.05,差异有统计学意义;A组与D组比较P>0.05,差异无统计学差异。4.灌胃4周后,B组、C组大鼠视网膜匀浆中cAMP、cGMP的浓度均高于A组、D组,P<0.05,差异有统计学意义;A组与D组比较,P>0.05,差异无统计学意义。5.灌胃4周后,WB检测VEGF相对表达量,B组、C组相对灰度值最高,且与A组、C组比较,P<0.05,差异有统计学意义。A组与D组比较,P>0.05,差异无统计学意义。6.灌胃4周后,WB检测PEDF相对表达量,B组、C组相对灰度值较低,且与A组、D组比较,P<0.05,差异有统计学意义。A组与D组比较,P>0.05,差异无统计学意义。结论:1.BN大鼠DR模型及DR激光术后模型有血瘀、阴虚火旺的症候特点。2.丹黄明目汤可以改善DR大鼠血瘀症候。3.丹黄明目汤可以改善DR大鼠阴虚火旺症候。4.丹黄明目汤可修复BN大鼠DR激光光凝术后视网膜。5.丹黄明目汤可降低BN大鼠DR激光光凝术后视网膜VEGF的相对表达,而提高PEDF的相对表达。同时VEGF、PEDF为一对拮抗性因子。6.养阴清热、活血利水之丹黄明目汤治疗DR的可能机制为:丹黄明目汤通过降低VEGF的相对表达,并上调PEDF的相对表达来修复视网膜组织损伤。
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