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目的：糖尿病是一种以高血糖为特征的代谢性疾病，也是严重威胁人类健康的流行性疾病。其中，2型糖尿病（T2DM）约占糖尿病总人数的90%。T2DM患者发生缺血性脑卒中的几率较正常人增加1.5至3倍，复发率比正常人多1倍。因此，寻找治疗T2DM及其脑血管并发症的药物，已受到国内外学者的广泛关注。在前期研究中发现从楤木皂苷中分离的竹节参皂苷IVa（CHS）具有较好的抗糖尿病及脑保护作用，但作用机制不清。本课题拟评价CHS治疗T2DM合并缺血性脑卒中的疗效，并进一步探讨其作用机制。 方法： （1）CHS对T2DM合并脑缺血/再灌注（CI/R）损伤小鼠的治疗作用：雄性C57BL/6小鼠，60只，随机分为6组，每组10只：Sham组：只穿线，不结扎；MCAO组：缺血60 min后再灌注24 h；CHS给药组（10 mg/kg、20 mg/kg和40 mg/kg）以及罗格列酮给药组（2 mg/kg）。采用高脂高糖喂养4周后，腹腔注射给予链脲佐菌素（STZ），连续5天，餐后2 h血糖高于11.1 mmol/L，即为T2DM模型。T2DM造模成功4周后，灌胃给予药物，每天一次，连续28天。对T2DM小鼠进行局灶性脑缺血（MCAO）60 min，再灌注24h，建立T2DM合并CI/R损伤模型。于再灌注24 h后进行神经功能学评分；测定脑梗死面积；测定脑组织中ROS、MDA、TNF-α和IL-6水平；Western bloting检测凋亡相关蛋白 Bcl-2、Bax和caspase3。 （2）CHS对T2DM合并CI/R损伤小鼠的作用机制研究：T2DM造模成功4周后，灌胃给予CHS（10 mg/kg、20 mg/kg和40 mg/kg），每天一次，连续28天。制作T2DM合并MCAO小鼠模型，缺血60 min后再灌注24 h，收集小鼠血清和脑组织。测定血清和脑组织中APN含量；测定脑组织中AdipoR1、AdipoR2、AMPK、P-AMPK、GSK-3β和P-GSK-3β蛋白表达情况。为了研究APN表达对AMPK和GSK-3β活性的影响，实验采用了脂联素（APN）敲除小鼠，同样诱导形成T2DM并进行MCAO模型制作，操作完全与野生型一致。 （3）CHS对PC12细胞缺氧/复氧（A/R）损伤的保护作用和机制研究：采用PC12细胞A/R损伤模型，将细胞计数后随机分为Control组：用正常培养基培养；A/R损伤组：缺氧3h，复氧培养6h；CHS给药组：在造模前给予不同浓度的CHS（10，20和40μmol/L），孵育24h后，缺氧3h，复氧培养6h；Ros组：给予1μmol/L罗格列酮24h，缺氧3h，复氧培养6h；40μmol/L CHS组：给予正常细胞40μmol/L的CHS，不造模，旨在观察最大给药剂量对正常细胞的毒性作用。测定细胞存活率、MDA和TNF-α含量；测定细胞凋亡率和caspase3表达情况；测定细胞中AdipoR1、AdipoR2、AMPK、P-AMPK、GSK-3β和P-GSK-3β蛋白表达情况。分别采用siRNA干扰蛋白表达或者特异性蛋白抑制剂抑制APN、AdipoR1、AMPK和GSK-3β蛋白活性，测定下游蛋白的表达情况。 结果： （1）CHS显著降低T2DM合并CI/R损伤小鼠神经功能学评分，减少脑梗死面积，抑制Bax的表达，促进Bcl-2表达，抑制caspase3的活化，降低MDA、ROS、IL-6和TNF-α水平。 （2）CHS显著增加T2DM合并CI/R损伤小鼠脑组织和血清中APN表达，并促使其与AdipoR1结合，进而促进脑组织中AMPK和GSK-3β磷酸化。 （3）CHS显著增加A/R损伤PC12细胞存活率，降低MDA和TNF-α水平，抑制细胞凋亡。CHS可促进PC12细胞内AdipoR1表达以及AMPK和GSK-3β磷酸化，浓度和时间依赖性的促进LKB1磷酸化。与siCon组比较，siAdipoR1组LKB1和AMPK磷酸化水平显著降低，表明CHS通过AdipoR1促进LKB1和AMPK磷酸化。与siCon比较，siAPN组LKB1、GSK-3β和AMPK磷酸化水平显著下降，表明CHS通过APN促进LKB1、GSK-3β和AMPK磷酸化。 结论：CHS对T2DM合并CI/R损伤小鼠具有保护作用，该作用可能基于其显著的抗氧化、抗炎、抗凋亡活性。进一步的机制研究表明，CHS通过促进APN表达，并与AdipoR1结合，从而激活LKB1/AMPK/GSK-3β信号通路，发挥神经保护作用。通过本课题的研究，对CHS治疗T2DM合并CI/R损伤的整体药效和作用机制有了更深入的认识，为开发安全有效的T2DM及其慢性并发症治疗药物奠定了基础。