昆虫病原真菌与植物源杀虫剂对蒙古拟地甲的防治研究初探

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拟地甲又称拟步甲或伪步行虫,我国常见拟地甲主要有蒙古拟地甲(Gonocephalum retiulatum)、网目拟地甲(Opatrum subaratum)和二纹土潜(Gonocephalum bilibneatus)。在四川省烟草种植区,土栖类拟地甲严重危害烟草,尤以烟苗受害最重。目前,四川植烟区的拟地甲种类不明确,与之相关的生物防治措施也少见报道。因此,本研究从四川凉山州的植烟区采集供试昆虫,观察其外部形态特征以及其在田间的生活习性,确定主要类群为蒙古拟地甲;选择本实验室保存的12株球孢白僵菌(Beauveria bassiana)菌株,比较培养性状及致病力,筛选出高毒力菌株,并探究其在蒙古拟地甲生物防治中的应用潜力;为初步探究高毒力球孢白僵菌菌株在田间应用的可能性,分析了菌株与植物源农药的相容性,并将菌株与四川烟田土壤中分离纯化的真菌对峙培养,明确土壤中真菌是否对球孢白僵菌菌株具有拮抗作用。本研究主要结果如下:1.对蒙古拟地甲的形态特征鉴定采用昆虫分类系统学的重要依据形态学进行鉴定。利用体视镜观察试虫的头、触角、前胸背板、足等部位器官,通过参考《中国烟草昆虫图鉴》、《中国农作物病虫害》、《烟草病虫害》等书籍以及相关文献,结合试虫的主要特征(成虫触角为念珠状,共11节且端部4节逐渐膨大、前胸背板两侧弧形,前缘凹入且前缘角较锐、鞘翅狭长,两侧有平行的隆起线且行间刻点细小;幼虫体色黄褐色,尾部末端有1白色浅纵沟,两侧各有刺7根;蛹为裸蛹,乳白色,腹部末端有2刺状突起),鉴定为蒙古拟地甲。2.对蒙古拟地甲高毒力菌株的筛选在SDAY平板上12株球孢白僵菌菌株的菌落形态相似,其中Bb06菌株的产孢量和萌发率最高,显著高于其他菌株,该菌株对蒙古拟地甲致病力最强,处理8 d后幼虫累计校正死亡率为83.66%,LT50为4.64 d,僵虫率为73.33%;成虫处理20 d后累计校正死亡率为82.97%;LT50为11.09 d。毒力测定结果表明Bb06菌株处理20 d后对蒙古拟地甲成虫的LC50为0.40×10~6孢子/m L。3.高毒力Bb06菌株对蒙古拟地甲幼虫以及成虫的侵染过程观察使用Bb06菌株1.0×10~8孢子/m L菌悬液分别对蒙古拟地甲幼虫、成虫进行浸渍接种,发现幼虫在接菌后2 d进食量减少,活力减弱,3~4 d之后出现死亡现象;死亡后第2~3 d幼虫头部、足、虫体体侧气门处及腹部末端会出现白色菌丝将其包裹,死亡后第7~9 d左右产生大量白色的分生孢子。成虫接种5 d后活动迟缓,进食减弱,头部及尾部末端会出现白色菌丝,开始出现死亡现象,随着时间推移,虫体腹部以及背部出现大量分生孢子,并将整个虫体包裹。4.高效植物源药剂筛选及其与Bb06菌株的相容性测定采用浸渍法处理试虫,发现0.3%苦参碱对蒙古拟地甲幼虫及成虫的毒力最高,其LC50分别为3.86 mg/L和9.47 mg/L。在SDAY平板中加入不同浓度的苦参碱,发现在培养5 d后,其中加入浓度为6.00 mg/L的0.3%苦参碱对Bb06菌株菌落的抑制率最低,但仍高达50.98%,培养10 d后的抑制率为42.03%。说明两者的相容性差,在防治实践中不适合混配。5.烟田土壤中真菌种类鉴定及其与Bb06菌株拮抗作用测定从四川凉山州烟田土壤中分离得到18株真菌,经形态学和分子生物学鉴定,其中15株为青霉(Penicillium limosum 6株、P.menonorum 4株、P.raperi 2株;P.nepalense、P.simplicissimum和P.citrinum各1株),2株为曲霉(Aspergillus lentulus),1株为淡紫拟青霉(Purpureocillium lilacinum)。将这些真菌与Bb06菌株通过室内对峙培养,发现10 d后对Bb06菌株的抑制效果不明显,抑菌率均在24%以下。
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