【目的】 建立定量检测白血病融合基因bcr/abl mRNA的方法，为白血病临床诊断及微小残留病（MRD）监测提供有用工具；探讨bcr/abl基因表达水平与白血病诊断、与预后的关系及在MRD检测中的意义。 【方法】 用荧光定量RT-PCR法（FQ-RT-PCR）测定34例不同类型白血病及处于不同疾病阶段的白血病病bcr/abl基因的表达。检测了19例慢性粒细胞白血病（CML），15例急性淋巴细胞白血病（ALL），并对其中6例bcr/abl基因阳性病例进行随访。bcr/abl荧光定量RT-PCR诊断试剂盒由中山医科大学生物技术研究所提供。取外周血5ml或骨髓血3ml，分离单个核细胞（MNC），常规提取RNA，用紫外分光光度计测A₂₆₀-A₂₈₀处的吸光光度值，计算RNA含量。逆转录（RT）合成cDNA，定量阳模标准品10倍稀释，作标准曲线。PCR反应终体积为50ul，在PE5700型扩增仪上作93℃2min预变性，然后93℃30s，55℃60s共做40个循环。反应结束后由荧光定量PCR仪直接作出定量结果及定量曲线，计算机算出bcr/abl mRNA的拷贝数。 【结果】 对照组bcr/abl基因均为阴性。19例CML患者bcr/abl基因表达阳性17例，总阳性率89.5％，经干扰素和羟基脲治疗达临床缓解者8例，bcr/abl基因表达均值为2.43×10²基因拷贝/ul；而初诊CML未经治疗者及治疗无效并发生急变或死亡者bcr/abl基因表达均值为2.60×10⁴基因拷贝/ul，与临床缓解者比较，经统计学检验，两者差异有显著性（P＜0.05）。对4例CML患者进行了随访，4例随访患者中，2例治疗后缓解者bcr/abl转录减少，但无阴转；2例bcr/abl转录持续增高者，1例发生急变，1例死亡。15例ALL患者中2例表达阳性，阳性率11.76％。2例ALL患者均复发，1例已死亡。动态观测2例bcr/abl基因表达转录复发前明显增高。bcr/abl mRNA表达水平与治疗效果、不同病期与复发有良好的相关性。bcr/abl定量PCR动力学检测可预测早期复发或急变。中文摘要 【结论1:荧光定量RT一PCR实验方法敏感、特异，避免了常规P CR操作中的诸多弊端。解决了常规PCR实验不能定量及扩增产物污染而导致的假阳性、操作繁杂等问题。结果用拷贝数表示，准确可靠，利于统一标准。bcr/abl基因表达水平及动态监测，更适合bcr/abl阳性白血病的诊断和随访