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本研究以中国马尾松树皮提取物为材料,旨在探讨其对体外培养的人喉癌细胞HEp-2生长的影响,以及相关的机理。
研究中,将细胞用PMBE处理后进行MTT活力检测以及DAPI染色荧光显微镜观察,发现PMBE可以诱导细胞凋亡而抑制其生长。用不同浓度的PMBE处理细胞不同时间,利用流式细胞术结合AO/EB染色荧光显微镜观察,检测PMBE诱导细胞凋亡的浓度-时间依赖性,证实凋亡量随着处理时间和PMBE浓度的增加而增加。通过检测PMBE不同处理条件下细胞培养液中的一氧化氮(NO)累积浓度,证实PMBE在一定条件下能降低细胞的NO积累。提取经过PMBE处理后细胞的总RNA,进行诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)的半定量RT-PCR分析。证实PMBE能抑制iNOS的表达,从而推测NO可能参与PMBE诱导喉癌细胞凋亡的作用。
本研究初步证实了PMBE能诱导喉癌细胞凋亡,而且诱导具有浓度-时间依赖性。同时,探讨了PMBE诱导凋亡的作用与其本身的抗氧化性以及清除自由基功能的关系,推测NO可能参与PMBE诱导细胞凋亡的作用。这些研究为进一步从分子水平揭示PMBE诱导凋亡的途径,以及其作为抗癌药物开发提供了依据。