【摘 要】
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α-葡萄糖苷酶抑制剂被广泛的用于预防或治疗糖尿病、艾滋病、乙肝以及肿瘤等相关疾病,具有广阔的药用开发价值。本研究通过合理的体外筛选模型对所设计的目标菌株进行初筛和
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α-葡萄糖苷酶抑制剂被广泛的用于预防或治疗糖尿病、艾滋病、乙肝以及肿瘤等相关疾病,具有广阔的药用开发价值。本研究通过合理的体外筛选模型对所设计的目标菌株进行初筛和复筛,从土壤微生物中获得了一株高产α-葡萄糖苷酶抑制剂的菌株UN-8。通过分析该菌株的培养特征、个体形态特征、相关生理生化特征和16SrDNA序列以及构建系统发育树,初步确定该目标菌株UN-8为淡紫灰链霉菌(Streptomyces lavendulae)。通过对菌株UN-8发酵产α-葡萄糖苷酶抑制剂的条件进行单因素和正交试验优化,得到最佳培养基组成为(g/L):玉米粉30、酵母膏12、KN030.3、K2HPO4O.5、NaCl0.5、FeSO4·7H20 0.01、MgSO4.7H2O0.5。得到最佳培养条件为:装液量30mL/250 mL,接种量4%,摇床转速160r/min,发酵时间3 d,培养基初始pH值8以及发酵温度34℃。在此发酵条件下,菌株UN-8发酵产α-葡萄糖苷酶抑制剂的抑制率为79.25%,是优化前的1.3倍。通过对菌株UN-8发酵产生的α-葡萄糖苷酶抑制剂的性质进行研究分析,表明此活性物质对温度、pH具有较好的稳定性,且属于极性较大的物质。通过对发酵液进行预处理、透析、SephadexG-25凝胶层析、Sephadex peptine 10/300凝胶层析、弱阴离子交换层析以及薄层层析等一系列初步分离纯化工序,得到了 α-葡萄糖苷酶抑制剂的抑制率为94.12%的活性物质,并确定该活性物质的分子量范围在1000～3500之间。最后通过比较经初步分离纯化后的活性物质与阿卡波糖两者对α-葡萄糖苷酶的抑制效果,表明此α-葡萄糖苷酶抑制剂具有良好的口服降糖药研究开发前景。
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