背景胶质瘤是成人脑部最常见的原发肿瘤,平均每年每10万中约为4-5人发病,并且其死亡率显著高于其他脑肿瘤。尽管在过去的几十年间,神经外科手术治疗与放射治疗的发展取得了长足的发展,但作为中枢神经系统最为常见的原发性肿瘤,胶质瘤的中位生存时间也仅仅在15个月左右。因此,研究胶质瘤发生发展的机制,并为寻找新的治疗胶质瘤的靶点提供理论基础,就显得尤为重要。TRIM29(tripartite motif-29),也被称作ATDC,属于TRIM蛋白家族的一员,该家族由70多名成员组成。TRIM蛋白家族以拥有一系列保守的结构域结构为特征,其中包括B-box1型(B1),B-box2型(B2)和RING指和卷曲螺旋(RBCC)结构域基元。目前研究显示,TRIM家族参与调节了多种生物学进程,例如细胞发育、分化、凋亡及肿瘤发生等。TRIM29(ATDC)基因位于染色体11q23位置,其最初被认为是遗传病共济失调毛细血管扩张中的异位基因,并发现其可以增加细胞的辐射抗性。据报道显示,TRIM29在多种肿瘤中发挥着重要的作用,其与肿瘤细胞的增殖、迁移以及成瘤能力等密切相关,但目前在胶质瘤中还未见到明确报道及研究。目的本研究旨在探究TRIM29在胶质瘤中的表达与患者临床特征的相关性、以及TRIM29对胶质瘤细胞增殖、迁移和成瘤性的影响,并对其内在机制进行初步探索。方法1.通过免疫组织化学法检测56例胶质瘤组织和正常脑组织中的TRIM29蛋白表达,并分析胶质瘤组织中TRIM29蛋白的表达与临床病理特征间的关系。通过Western blot法在胶质瘤常见细胞株(A172、LN-229、U-87 MG、U-118MG)中检测TRIM29蛋白的表达谱。2.利用RNA干扰技术获得稳定敲低的shTRIM29组细胞。并通过Transwell、MTT、BrdU及软琼脂克隆形成实验,检测TRIM29对胶质瘤细胞迁移、增殖能力的影响。3.通过裸鼠皮下成瘤模型的构建,检测TRIM29在体内对胶质瘤细胞增殖、成瘤能力的影响。4.采用Western blot法检测TRIM29对AKT信号通路相关蛋白的影响,探究TRIM29调节胶质瘤增殖、成瘤、迁移能力的内在机制。结果1.免疫组化结果显示,TRIM29蛋白表达在胶质瘤组织中多以强阳性表达为主,而在正常脑组织中则多为阴性或弱阳性表达为主。此外,通过相关性分析发现,TRIM29在胶质瘤中的表达与肿瘤WHO分级呈正相关(r=0.535,P<0.05);与年龄、性别等无明显相关性(P>0.05)。Western blot法检测显示,TRIM29在胶质瘤常见细胞株A172、LN-229、U-87 MG、U-118MG中均有表达,且在恶性程度较高的U-87 MG细胞株中的表达量明显高于其他细胞株,故选取该细胞株进行后续实验。2.RNA干扰处理后,得到TRIM29稳定敲低的shTRIM29组的U-87 MG细胞。Transwell、MTT、BrdU及软琼脂克隆形成实验结果显示,敲低TRIM29可明显抑制胶质瘤细胞的迁移能力,同时BrdU标记阴性细胞数量下降,细胞的克隆形成能力也明显减弱,说明TRIM29在胶质瘤细胞增殖、迁移中发挥重要作用。3.裸鼠体内成瘤实验结果提示,敲低TRIM29后肿瘤的生长速度减慢,体积降低,同时Ki67的表达量也明显降低。4.通过Western blot检测发现,TRIM29的敲低可引起AKT的活化形式p-AKT表达的降低。结论1.TRIM29在胶质瘤组织中表达上升,与胶质瘤的WHO分期呈正相关,同时TRIM29在胶质瘤细胞株中均有表达,且在恶性程度较高的U-87MG细胞中表达明显升高,提示TRIM29的高表达与胶质瘤的恶性程度密切相关。2.下调TRIM29的蛋白表达可抑制胶质瘤细胞的增殖、迁移能力。3.下调TRIM29的表达,可在体内抑制胶质瘤细胞的增殖、成瘤能力,说明TRIM29是影响胶质瘤发展的关键因素。4.TRIM29可能通过AKT信号通路,对胶质瘤细胞的增殖、成瘤、迁移进行调控。