该文应用免疫组织化学、细胞生物学及分子生物学等技术和方法,探讨淋巴瘤组织和细胞中p16基因的异常情况,p16基因转录及蛋白表达的情况,了解p16基因异常在淋巴瘤中的发生率及其与淋巴瘤恶性程度的关系,并在体外研究中观察了DNA甲基化抑制剂5-氮杂-2-脱氧胞嘧啶(5-aza-2-deoxycytideine,5-AzaCdR)对p16基因高甲基化状态的逆转及这种逆转效应对淋巴瘤细胞株药物敏感性的影响.全文共分三个部分:第一部分,淋巴瘤中p16蛋白的表达及其临床病理相关性;目的:研究淋巴瘤石蜡标本中的p16蛋白表达情况,同时检测Rb蛋白的表达,了解p16蛋白的失表达频率与淋巴瘤病理类型的相关性;淋巴瘤中p16蛋白与Rb蛋白表达之间的关系.结论:(1)恶性淋巴瘤中p16蛋白的失表达率较高,与p16蛋白密切相关的Rb蛋白也有一定比例的失表达.(2)p16及Rb蛋白的失表达仅见于恶性淋巴瘤组织,在反应性增生的淋巴结组织中则不出现;p16及Rb蛋白的失表达在淋巴瘤的发生、发展过程中可能有协同作用.(3)p16蛋白的失表达与淋巴瘤的恶性程度相关,一定程度上可以作为淋巴瘤预后判断的一个指标.第二部分,淋巴瘤中p16基因异常的研究.目的:研究淋巴瘤组织中p16蛋白失表达的主要基因机制,观察p16基因异常及p16基因表达的异常、基因异常与表达异常以及与淋巴瘤恶性程度的关系.结论:(1)淋巴瘤中p16基因的缺失或高甲基化均可导致p16蛋白的失表达.相对缺失而言,异常高甲基化引起的p16基因失活在淋巴瘤中更为多见.(2)p16基因异常发生率高的淋巴瘤多恶性程度较高,p16基因mRNA及蛋白的表达也相应降低.第三部分,p16基因高甲基化逆转对淋巴瘤细胞株药物敏感性的影响.目的:了解淋巴瘤细胞株中p16基因的异常情况,p16基因异常高甲基化的细胞株在脱甲基药物5-AzaCdR处理后生物学性状以及对化疗药物阿霉素及长春新碱敏感性的变化.结论:(1)5-AzaCdR可以使Raji细胞株高甲基化的p16基因重新活化,p16基因的表达恢复,且这种作用有可遗传性.(2)脱甲基化处理可以使Raji、BJAB及Jurkat这三种淋巴瘤细胞株的生长特性发生改变,倍增时间延长,G1期细胞百分比增加,对化疗药物的敏感性有不同程度的增加,这种效应在p16基因异常高甲基化的Raji细胞株中表现尤为明显.(3)5-AzaCdR可能有增加淋巴瘤细胞株药物敏感性的作用.脱甲基药物的应用可以为p16基因异常高甲基化患者的临床治疗提供一个新的思路.