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蓼实为蓼属植物水蓼的果实,内含丰富的黄酮类化合物和宏量元素K、Ca。黄酮类化合物具有多种重要的生理功能,在医药、化妆品、保健品领域具有广阔的应用前景。宏量元素K、Ca是人体组成的必需元素,对生命的意义重大。本课题以蓼实干燥品为原料,黄酮类化合物和宏量元素K、Ca为研究对象,系统的研究了蓼实总黄酮的提取与纯化工艺,测定了宏量元素K、Ca在黄酮提取、纯化过程中的分布情况,为进一步开发利用蓼实提供了实验依据。本课题主要进行了以下的研究工作: 1.蓼实总黄酮的分析 根据颜色反应对黄酮类化合物进行定性分析,结果表明,蓼实提取液中含有黄酮体化合物。采用分光光度法定量分析蓼实总黄酮含量,研究了显色稳定性、精密度、重现性、加标回收率对测量结果的影响,并得到最佳测定条件:最大吸收波长为510nm,最佳显色剂为5%的亚硝酸钠溶液、10%的硝酸铝溶液和4%氢氧化钠溶液。 2.蓼实总黄酮的提取 采用单因素与正交试验,优化了蓼实总黄酮的乙醇回流提取工艺,其最佳提取条件为:乙醇浓度(v/v)70%,固液比(g/mL)1:15,回流提取时间2.0h,回流提取2次,提取温度(水浴)85℃。在此条件下,蓼实总黄酮含量百分比为6.027%,K、Ca的提取率分别为3.028%、0.229%。 3.蓼实总黄酮的分离纯化 液—液萃取法分离纯化蓼实总黄酮:黄酮损失率为27.76%,纯化液浊度为7.50,纯度为70.88%,K、Ca的直收率分别为82.734%、95.570%。膜法分离纯化蓼实总黄酮:黄酮损失率为0,纯化液浊度为6.50,纯度为46.59%,纯化液中K、Ca的直收率分别为100%、70.973%。本试验还确定了0.1μm滤膜—大孔吸附树脂联用法分离纯化蓼实总黄酮的最优条件:吸附接触时间0.35h、吸附液浓度1.0mg/mL、吸附液pH值3.5、吸附液体积:树脂量(mL/g)=7:1、解吸剂乙醇、解吸接触时间1.0h、解吸剂浓度(v/v)85%、解吸剂体积:树脂量(mL/g)=7:1。在此条件下,黄酮损失率为39.76%,解吸液浊度为4.0,纯度为50.17%,纯化液中K、Ca的直收率分别为27.049%、25.154%。 对比三种纯化方法可知,0.1μm滤膜—大孔吸附树脂联用法应该是一种有前途的黄酮纯化方法。