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研究背景急性肺损伤（Acute Lung Injury，ALI）是一种危重的临床综合症，具有较高的致死率。其特征表现为急性发作的肺功能障碍，伴有显著的低氧血症和广泛的渗出。在胸外科领域，ALI也是主要的术后危重并发症之一。高迁移率族蛋白B1（high mobility group box1，HMGB1）是一种DNA结合蛋白，在胞内主要功能是稳定核小体结构和负责基因转录调控。当细胞发生凋亡或坏死，该蛋白可以释放到胞外，作为一种后期促炎因子刺激机体产生炎症反应。在以脓毒症休克为特征的急性肺损伤中，HMGB1能持续刺激机体产生炎症反应。因此抑制HMGB1的免疫学活性，有望为治疗ALI等全身性炎症疾病提供更为宽广的时间窗。目前研究证据表明，HMGB1的作用受体为Toll样受体TLR2、TLR4，以及糖基化终末产物受体（thereceptor for advanced glycation end products，RAGE）。其中TLR2和TLR4的作用似乎更加明显，而RAGE只起到了很小的作用。单一免疫球蛋白白细胞介素1受体相关蛋白（SIGIRR）是Toll-IL-1受体（TIR）超家族的成员之一，可以负性调节诸多Toll样受体（TLRs）介导的固有免疫应答。SIGIRR对Pam3Cys诱导的肾脏单核细胞TLR2信号通路有抑制作用，而且多篇文章报道了SIGIRR对于LPS诱导的TLR4信号通路也有抑制作用。HMGB1主要通过TLR2和TLR4发挥胞外致炎作用，因此推测SIGIRR对HMGB1诱导的炎症反应有抑制作用。目的本研究的目的是通过观察SIGIRR对HMGB1诱导的人肺泡上皮细胞株A549炎症作用的影响，明确SIGIRR在ALI晚期的抗炎作用，并为ALI的基因治疗提供理论依据。方法构建含有SIGIRR cDNA全长的真核表达载体pCDNA3.1（+），瞬时转染人Ⅱ型肺泡上皮细胞来源的A549细胞，使SIGIRR在A549细胞中过表达，采用Western blot和RT-PCR法检测其表达。HMGB1刺激A549细胞后，双荧光素酶报告基因系统检测转染前后核转录因子κB（Tumor NecrosisFactor-α，NF-κB）转录活性的改变，ELISA检测转染前后炎症因子肿瘤坏死因子α（Tumor Necrosis Factor-α，TNF-α）、白细胞介素1β（Interleukin-1β，IL-1β）蛋白表达水平的变化。结果转染SIGIRR表达载体的A549细胞，其SIGIRR表达量显著上升。HMGB1刺激后，双荧光素酶报告系统检测发现，NF-κB转录活性明显升高，而转染SIGIRR表达载体后NF-κB转录活性下降。ELISA实验结果表明，过表达SIGIRR的A549细胞在接受HMGB1刺激后其炎症因子TNF-α及IL-1β蛋白表达水平明显低于对照组。结论SIGIRR表达上调可以抑制HMGB1诱导的A549细胞炎症因子TNF-α和IL-1β的产生。A549细胞转染前后NF-κB转录活性的改变提示SIGIRR的抗炎作用可能与其参与NF-κB转录活性的调控有关。