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目的:1.本课题是通过蛋白芯片（protein chip）技术检测乳腺癌（breast cancer）患者、乳腺良性病变患者和正常女性血清中肿瘤标志物（tumor markers）表达的差异,筛选出对乳腺癌有临床价值的肿瘤标志物,分析其诊断价值,探讨其升高的可能原因;2.通过蛋白芯片技术检测乳腺癌患者血清肿瘤标志物水平与肿瘤大小、淋巴结转移状况的相关性,探讨肿瘤标志物对病情判断的临床意义;3.检测乳腺癌患者手术前后、术后复发转移血清肿瘤标志物水平的变化并进行分析,探讨肿瘤标志物在乳腺癌病情监测,预后判断的临床意义;4.通过蛋白芯片技术的应用,分析蛋白芯片技术的临床价值。方法:采用多肿瘤标志物蛋白芯片诊断系统,检测分析90例乳腺癌患者,60例乳腺良性病变和100例正常对照者血清12种常见肿瘤标志物,包括糖类抗原199（CA199）、甲胎蛋白（AFP）、神经原特异性烯醇化酶（NSE）、游离前列腺特异抗原（f-PSA）、前列腺特异杭原（PSA）、癌胚抗原（CEA）、糖类抗原242（CA242）、糖类抗原125（CA125）、糖类抗原153（CA153）、铁蛋白（FER）、人生长激素（HGH）和人绒毛膜促性腺激素（HCG）;首先静脉采血,静置离心;试验前将标准品稀释;将各待测血清或不同浓度的标准品滴加到不同的芯片分格内;将蛋白芯片温育振荡,洗涤;芯片小方格内各加入反应液,温育振荡,取出弃去孔内液体;剥离蛋白芯片集成块的上部,放入洗盒中,洗涤4次;加入检测液,用HD-2001A蛋白芯片仪对蛋白芯片读取数据,获得结果。采用SPSS 13.0统计软件进行数据分析,计数资料采用χ2检验;3组样本率的比较采用χ2分割法;计量资料采用t检验;3组样本均数间的多重比较采用SNK-q检验;应用logisitic逐步回归筛选出有临床价值的肿瘤标志物,获得相应的数学模型即回归方程,通过ROC曲线分析CEA,FER,CA125,CA153及logistic回归结果的曲线下面积（AUC）。结果:乳腺癌组CEA、CA125、FER、CA153水平均显著高于乳腺良性病变组和正常对照组,有显著统计学差异（P＜0.01）;乳腺良性病变组CEA、CA125、FER、CA153与正常对照组差异无显著性意义（P＞0.05）;而CA199、NSE、CA242、HCG、AFP、f-PSA、PSA、HGH在乳腺癌组、乳腺良性病变组和正常对照组间差异未见统计学意义;乳腺癌组与正常对照组血清CEA、CA125、FER、CA153的logistic回归方程P1=1/1+e-（-1.29+2.25×CEA+3.12×CA125+10.59×CA153）;乳腺癌组、正常对照组CEA、CA125、FER、CA153和联合CEA、CA125、CA153三种肿瘤标志物的logistic回归曲线转化参数P1的ROC曲线中,单独检测时CA153的AUC最大,有统计学意义（P=0.000）,CA125、CA153、CEA、FER联合检测的AUC大于各项肿瘤标志物单项检测的AUC,有统计学意义（P=0.000）。乳腺癌患者腋淋巴结转移组CEA、CA125、FER、CA153水平及阳性率高于无转移组,有显著统计学差异（P＜0.01）;淋巴结转移组与无淋巴结转移组血清CEA、CA125、FER与CA153的logistic回归方程P2=1/1+e-（-2.27+2.05×CEA+1.94×FER+1.06×CA125+1.84×CA153）;淋巴结转移组与无淋巴结转移组血清CEA、CA125、FER、CA153和四种肿瘤标志物的logistic回归曲线转化参数P2的ROC曲线中,单独检测时FER的AUC最大,有统计学意义（P=0.000）,四种肿瘤标志物联合检测的AUC大于各项肿瘤标志物单独检测的AUC,有统计学意义（P=0.000）;乳腺癌患者肿瘤直径d＞3cm组CEA、CA125、FER、CA153水平均显著高于肿瘤直径d＜3cm组,有显著统计学差异（P＜0.01）。单因素logistic回归分析CEA,CA125,FER,CA153是肿瘤大小的危险因素。乳腺癌患者术后组血清CEA、FER、CA125和CA153水平明显降低,与术前组比较,差异均有显著性意义（P＜0.01）;手术后3个月患者血清CEA、FER、CA125和CA153水平与正常对照组比较,差异无显著性意义（P＞0.05）;乳腺癌复发转移组患者血清CEA、FER、CA125、CA153水平与无复发转移组比较、差异均有显著性意义（P＜0.01）;复发转移组与无复发转移组血清CEA、CA125与CA153的logistic回归方程P3=1/1+e-（-21.00+11.50×CEA+20.31×CA125+21.70×CA153）;复发转移组与无复发转移组CEA、CA125、FER、CA153和联合四种肿瘤标志物的logistic回归曲线转化参数P3的ROC曲线中,单独检测CA153的AUC最大,有统计学意义（P=0.000）;四种肿瘤标志物联合的AUC大于肿瘤标志物单项检测的AUC,有统计学意义（P=0.000）。结论:应用蛋白芯片技术联合检测肿瘤标志物对乳腺癌的诊断、监测其复发和转移均有较高的临床价值;血清CA125、CA153、CEA、FER是乳腺癌辅助诊断的理想指标,其联合检测有利于提高乳腺癌的诊断率;血清CA125、CA153、CEA、FER为乳腺癌患者腋淋巴结转移的高危因素,与肿瘤大小正相关,其血清水平反映了机体的肿瘤负荷;动态监测CA125、CA153、CEA、FER对乳腺癌预后具有重要临床价值;联合检测CA125、CA153、CEA、FER对于乳腺癌淋巴结转移的判断,手术前后、复发转移的病情监测是比较理想的检测指标,是监测乳腺癌复发转移较好的肿瘤标志物组合;CA199,NSE,CA242,HCG,AFP,f-PSA,PSA,HGH这些指标对乳腺癌诊断价值较低;作为一种统计手段,logistic回归可改善诊断的灵敏度和特异性。