论文部分内容阅读
长寿花(Kalanchoe blossfeldiana T.)又名圣诞伽蓝菜、红落地生根,为景天科(Crassulaceae)伽蓝菜属(Kalanchoe)多浆植物。其原生种产于马达加斯加岛。由于长寿花花期长、耐干旱、栽培容易、装饰效果好,且它可全草入药,具有解热、散淤、解毒、止血的功效,其发展的前途非常看好。长寿花的常规繁殖方法为茎段扦插及叶片扦插,但受季节影响大,繁殖速度慢。目前,对长寿花的组培快繁方面已有一些报道,主要集中在叶片及茎尖单一外植体的培养研究方面,同时进行几种外植体的研究报道则很少,缺乏系统性;而国内未见长寿花育种相关报道。本研究以盆栽‘Petero’优良长寿花品种为试验材料,通过系统研究,探索最适的外植体和最佳快繁条件,以建立长寿花的离体再生与快繁体系;同时,采用离体培养结合秋水仙素诱导技术对长寿花进行多倍体诱导,以获得观赏性及抗逆性更强的长寿花多倍体新类型,并对获得的多倍体和二倍体进行比较,为长寿花的倍性育种奠定基础。试验结果表明,长寿花外植体用75%乙醇消毒60s、0.1%HgCl2消毒5min后,用无菌水冲洗3~5次接入培养基中,成活率达70%;在叶柄、叶片及无腋芽茎段几种材料中,诱导丛生芽的最佳外植体为叶片,其最适培养基为MS+6-BA 2.5mg/L+IBA 1.0mg/L;继代增殖时芽分化的最适培养基为MS+6-BA2.0 mg╱L+IBA0.1mg/L;最适的生根培养基为1/2MS+IBA0.1mg/L,生根率可达95%。对离体培养条件下的再生植株抽样进行染色体数目检测发现,均为2n=2x=34,二倍体遗传稳定;分别采用了浸泡法和混培法,利用秋水仙素溶液处理长寿花的茎尖进行多倍体离体诱导,结果表明,以0.3%秋水仙素溶液浸泡处理24h效果最好,四倍体诱导率达到20%;再生四倍体有纯合四倍体,也有四倍体与二倍体的嵌合体。通过分离继代培养,从嵌合体中也得到了纯合四倍体。经检测表明,在同一环境条件和生长阶段下,叶片变绿,叶形指数变小,其叶片的长度、宽度、厚度分别为二倍体的157.1%、227.3%、166.7%,叶形指数为二倍体的68.4%:在气孔结构方面,四倍体的保卫细胞明显增大,其横径与纵径约分别为二倍体的150.6%与154.2%,保卫细胞内的叶绿体数目明显增多,约为二倍体的140.7%,而气孔密度明显下降,约为二倍体的60.0%。对四倍体和二倍体叶片电导率进行测定,其结果显示:在经过40℃处理后,四倍体的电导率平均值为35.6μS·cm-1,二倍体的电导率平均值为58.5μS·cm-1,二倍体的电导率为四倍体的1.64倍,差异达极显著水平。高温(40℃)处理后二倍体的外渗率明显大于四倍体,是四倍体的3.27倍,差异达极显著水平,表明四倍体比二倍体的抗逆性增强。长寿花四倍体花茎粗细平均值是二倍体的2.0倍:花茎长度平均值是二倍体的1.39倍;花朵数量平均数比二倍体多57.6朵;花朵大小是二倍体的1.16%;开花期推迟13天,观花期增加12天。表明四倍体长寿花不仅体现了营养器官的巨大性,而且花茎增粗,花朵数量增加,是一种观赏性更强的观花观叶兼用的新类型。通过本研究,不仅建立起了长寿花的离体再生与快繁体系,还培育出了花叶等观赏器官增大,抗逆性增强,具有特殊观赏价值与利用价值的长寿花四倍体新种质。