本研究旨在研究重组海参(Stichopus japonicus)溶菌酶(rSjLys)可溶性表达的发酵条件。实验采用多因素正交优选法,以摇瓶培养方式,从培养基组分,发酵条件两个方面对重组海参溶菌酶进行研究。构建了高效分泌型表达重组海参溶菌酶工程菌。研究结果发现该工程菌在优化培养基中最佳发酵诱导表达条件为30℃、140r/min、诱导剂为浓度0.3mmol/L、再诱导表达培养14h后,其目的蛋白分泌表达量可达到30-40mg/L。实验结果表明,利用SDS-PAGE电泳对优化后基因工程菌表达情况进行分析,重组海参溶菌酶表达量有明显增加,进一步证实条件优化后对重组海参溶菌酶分泌表达具有十分明显的促进作用。通过管碟法和抑菌谱实验,将纯化后rSjLys进行抑菌活性检测,确定它们的抗菌特性。结果发现,rSjLys对溶壁微球菌,副溶血弧菌和金黄色葡萄球菌都有抑菌活性,此外rSjLys加热后对溶壁微球菌,副溶血弧菌和金黄色葡萄球菌的抑菌活性比加热前提高了21%-52%。上述结果表明,构建的重组海参溶菌酶及多肽的基因工程菌能够高效表达重组蛋白及多肽,产物具有可溶性的和抑菌活性,这些产品将在水产养殖、畜禽养殖、食品加工、饲料添加剂等行业具有很大的开发潜力和市场应用价值。