玉屏风总苷的提取、分离与抗炎免疫作用研究

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本课题采用中药化学提取分离、精制纯化的技术与手段,对玉屏风散中具有抗炎免疫作用的有效成分进行研究,分离得到复方中总的有效部位——玉屏风总苷(total glucosides of Yu ping feng,TGYPF)。并以黄芪甲苷的含量为质控指标,经L9(34)正交试验设计筛选出玉屏风总苷的最佳提取条件——8倍量80%乙醇,回流提取3次,每次2h。 采用HPLC-ELSD法对君药黄芪中黄芪甲苷的含量进行了测定,平均回收率为95.33%,RSD为1.52%,并对其含量测定进行了方法学考察。结果表明,该法精密度、重现性良好,简便易行、快速准确,适用于黄芪甲苷的分析测定。对复方中的其它成分,分别采用薄层色谱法(TLC)进行定性鉴别,从而为确定玉屏风总苷的质量标准提供了试验依据。 本文采用多种急、慢性炎症模型和通过一系列体内免疫药理实验,研究了玉屏风总苷(total glucosides of Yu ping feng,TGYPF)的抗炎免疫调节作用并探讨其部分作用机制。结果如下: 1.TGYPF的抗炎作用 TGYPF(24,48,96mg·kg-1)对二甲苯诱导的小鼠耳肿胀具有明显的抑制作用。TGYPF(16、32、64mg·kg-1,ig)对角叉菜胶诱导的大鼠足爪肿胀、棉球诱导的大鼠肉芽肿均有明显的抑制作用。提示TGYPF有明显的抗炎作用。 2.TGYPF的免疫调节作用 TGYPF(24、48、96 mg·kg-1,ig)可明显增加Cy诱导免疫功能低下小鼠脾细胞和血清中溶血素水平,提高免疫功能低下小鼠的体液免疫功能,能明显增强Cy诱导的免疫低下小鼠DTH反应,使其恢复至接近正常水平,提高免疫功能低下小鼠的细胞免疫功能。进一步研究发现,TGYPF(48、96 mg·kg-1,ig)可明显提高CD4+、CD8+细胞数,使CD4+/CD8+细胞比值上升。提示TGYPF的免疫调节作用与调节T细胞亚群有关。
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