【摘 要】
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该研究通过PCR的方法,从pBlueScript载体上得到人穿孔素基因并加上双酶切位点,装入昆虫杆状病毒转移载体pAcSecG2T中,然后将该重组转移载体和野生型昆虫杆状病毒共转染Sf9细
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该研究通过PCR的方法,从pBlueScript载体上得到人穿孔素基因并加上双酶切位点,装入昆虫杆状病毒转移载体pAcSecG2T中,然后将该重组转移载体和野生型昆虫杆状病毒共转染Sf9细胞,通过体内同源重组,使人穿孔素基因插入苜蓿夜蛾核型多角体病毒(AcNPV)的基因组中,筛选得到重组病毒,纯化后感染Sf9细胞,表达了含凝血酶位点的谷胱甘肽-S-转移酶(GST)与人穿孔素的融合蛋白.表达上清呈现钙依赖性溶红细胞活性,最佳表达时间为96小时.同时,通过Dot Blot检测表明具有免疫活性.
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