论文部分内容阅读
目的: 探索聚酯基类生物材料-曲安奈德药膜的制备、表征和优化,确定药膜体外、体内的缓释性能及药物在眼内的分布情况,以获得一种理想的生物可降解的治疗眼后段疾病的巩膜表面贴附缓释药膜。 方法: 以聚己内酯(PCL)作为载体,曲安奈德(TA)作为模型药物,采用喷雾干燥的方法制备出PCL-TA缓释药膜,将该药膜缝合在兔眼和豚鼠巩膜表面,进行缓释药膜的体内研究,将取下的药膜进行扫描电镜观察和凝胶色谱仪(GPC)分子量的测定以确定生物材料在动物体内的降解情况。将该药膜缝合在动物眼球巩膜表面,测定动物眼球组织内不同部位的药物浓度,了解药物在眼球内的差异分布情况,以确定该药膜治疗眼后段疾病是否有较好的靶向作用。 在研究过程中发现聚己内酯(PCL)材料降解比释药缓慢,故采用激光打孔和更换材料两种不同的方法进行药膜的优化。 对上述聚己内酯-曲安奈德(PCL-TA)药膜进行激光打孔,根据药膜上孔洞分布情况的不同将药膜分成三组,将药膜缝合在灰兔眼球巩膜表面,以确定激光打孔是否可以加速药膜的降解。 选用四种不同聚酯基类生物材料聚羟基乙酸((LA∶GA75∶25)和聚己内酯的1∶1共混材料PLGA(75∶25)/PCL、聚羟基乙酸(LA∶GA50∶50)和聚己内酯的1∶1共混材料PLGA(50∶50)/PCL、聚左旋乳酸己内酯P(LLA-CL)、聚乳酸-三亚甲碳酸酯共聚物P(DLLA-TMC))作为载体,曲安奈德作(TA)为模型药物,采用上述相同的方法制备出四种载药量相近、厚度、大小均相同的缓释药膜,进行体外释放研究,根据体外释放的结果,从中挑选两种药膜并缝合在兔子巩膜表面进行临床观察,了解缓释药膜的生物相容性和药膜在体内的降解情况,将取下的药膜进行扫描电镜观察和凝胶色谱仪(GPC)分子量测定确定材料降解情况,以选出更加优化的缓释药膜。最后,再次对比聚己内酯—曲安奈德缓释药膜与聚左旋乳酸己内酯—曲安奈德缓释药膜体外释放情况,确定两种药膜的优劣性。 结果: 用喷雾干燥法制备的PCL-TA缓释药膜载药量为56.3023±0.8124%,药膜厚度为341±8μm,PCL-TA缓释药膜体外释放结果显示与等量的裸药相比,缓释药膜表现出更加持久缓释的释药趋势,药膜释药比裸药缓慢3倍,释药时间从30天延长至90天。收集不同时间点从动物体内取下的缓释药膜,在电镜下观察和凝胶色谱仪测定分子量的结果均显示药膜中的生物材料在一定程度上有所降解,降解从植入后第三个月开始明显,第4个月分子量约有25%变小。靶向治疗实验一结果表明,巩膜表面药膜组,豚鼠和兔子给药侧的玻璃体、视网膜、脉络膜药物浓度明显高于对侧(豚鼠玻璃体给药侧VS对侧:916.55±586.17ng/ml VS482.94±279.64ng/ml;兔子玻璃体给药侧VS对侧:156.29±129.02ng/ml VS19.48±26.39ng/ml;豚鼠脉络膜/视网膜给药侧VS对侧:9200.77±10877.62 ng/mlVS634.43±1253.02 ng/ml;兔子脉络膜给药侧VS对侧:2689.03±1452.58 ng/mlVS693.80±916.76ng/ml;兔子视网膜给药侧VS对侧:1489.70±1275.47 ng/ml VS227.16±278.34 ng/ml);传统的筋膜下给药组,给药侧动物的眼组织药物浓度与对侧差别幅度明显比药膜组小(豚鼠玻璃体给药侧VS对侧:1789.36±2504.94ng/ml VS1423.05±3696.45ng/ml;兔子玻璃体给药侧VS对侧:156.29±129.02ng/ml;豚鼠脉络膜/视网膜给药侧VS对侧:980.54±947.46 ng/ml VS14650±219.38 ng/ml;兔子脉络膜给药侧VS对侧:2820.37±6988.26 ng/mlVS333.32±545.13ng/ml;兔子视网膜给药侧VS对侧:148.09±204.17ng/mlVS395.48±5791.95ng/ml)。靶向实验二结果表明,巩膜表面药膜组,药膜缝合处眼内组织药物浓度最高,距离药膜缝合处越远眼组织内药物浓度越小。 激光打孔加速实验中,5个月内在手术显微镜下观察三组激光打孔药膜没有明显差异。 四种不同材料制备的药膜体外释放研究表明,四种药膜释放速率总体差别不大,但聚左旋乳酸己内酯—曲安奈德(P(LLA-CL)-TA)缓释药膜释药速度最快。根据体外释放的结果和材料的性质,选取共聚材料中释放速度较快的聚左旋乳酸己内酯—曲安奈德(P(LLA-CL)-TA)缓释药膜和共混材料聚羟基乙醇(PLGA)中单体乳酸含量较少的聚羟基乙醇/聚己内酯—曲安奈德(PLGA(50∶50)/PCL-TA)缓释药膜进行动物实验。将药膜缝合在兔眼巩膜表面临床观察发现,缝合PLGA(50∶50)/PCL-TA药膜的兔眼结膜充血情况严重于P(LLA-CL)-TA药膜组,表明PLGA(50∶50)/PCL-TA药膜生物相容性较差,扫描电镜观察和凝胶色谱仪GPC测定不同时间点分子量的结果显示PLGA(50∶50)/PCL-TA药膜降解速度慢于P(LLA-CL)-TA缓释药膜。最终选定P(LLA-CL)-TA缓释药膜为我们下一步的研究药膜,再次对比P(LLA-CL)-TA缓释药膜与PCL-TA缓释药膜体外释放,结果显示P(LLA-CL)的降解速度明显快于PCL,P(LLA-CL)材料的降解与药物的释放能达到很好的一致性。 结论: 聚己内酯—曲安奈德(PCL-TA)巩膜表面缓释药膜不仅具有良好的生物相容性,而且具有一定程度的可控性和较好的缓释性能,PCL材料在眼球表面有一定程度的降解,但降解速度太慢,不能与药物的释放同步。此外,与传统的筋膜下给药相比,PCL-TA巩膜表面缓释药膜在治疗眼后段疾病具有更好的靶向给药的作用。 激光打孔是否可以加速PCL-TA巩膜表面缓释药膜的降解有待进一步研究,是否可作为改良PCL-TA巩膜表面缓释药膜的一种方法也需要进一步探究。聚左旋乳酸己内酯—曲安奈德(P(LLA-CL)-TA)缓释药膜不仅具有良好的生物相容性,而且其释药性能优于PCL-TA药膜,有望成为更加理想的治疗眼后段疾病的巩膜表面缓释药膜。