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本研究采用本课题组分离鉴定的鸡传染性支气管炎肾型毒株IBVWHNJ，根据Genbank中已经注册的IBV M基因序列设计一对引物，通过RT-PCR方法扩增出IBVWHNJ的M基因。对M基因克隆测序结果表明，IBVWHNJ M基因的编码序列全长678bp，编码225个氨基酸，与国内外发表的9个毒株M基因核苷酸序列相比较的同源性为91.6％～100％，相应氨基酸同源性为91.6％～100％。将鸡传染性支气管炎病毒分离株IBVWHNJ M基因在Genbank中注册，注册号为AY302742。 将已经克隆的IBVWHNJ M基因亚克隆至真核表达质粒pcDNA3.1上，得到重组质粒，用酶切、菌落PCR鉴定，结果表明，M基因正确插入pcDNA3.1中，成功制备了重组质粒pc-M。采用类脂薄膜水化法制备了阳离子脂质体，按10：1的比例用脂质体包被重组质粒pc-M，并通过透射电镜观察，结果表明，阳离子脂质体大小为30-200nm，包被后的复合物大小为50-400nm，形状不规则。本研究制成了IBVWHNJ基因pc-M重组质粒DNA疫苗、脂质体包被的IBVWHNJ M基因pc-M重组质粒DNA疫苗各一种。 对脂质体包被的重组质粒pc-M组、重组质粒pc-M组和空白对照组，进行了重组质粒DNA疫苗的免疫原性研究。试验组的免疫剂量为1ml（含200ugDNA）／羽，四点腿部肌肉注射，10日龄首免，17日龄相同剂量二免，对照组不作任何处理。免疫前、24日龄、31日龄颈静脉采血，用全自动生化分析仪和BC-2000血细胞分析仪检测外周血液中免疫球蛋白和白细胞的含量，用SPSS软件对三组结果进行统计学计算，分析结果表明：IBVWHNJ基因DNA疫苗免疫后，外周血液中IgG、IgA、IgM含量显著升高，白细胞数量、淋巴细胞含量也显著提高，脂质体包被后免疫水平上升高于未包被组，而对照组无明显变化，统计结果表明，试验组与对照组相比差异显著。35日龄时以0.2ml(102EID50)剂量的IBVWHNJ株对各组攻毒，统计攻毒后的发病、死亡、保护情况。结果显示，攻毒后试验组没发病，对照组第四天发病，出现了呼吸道症状并有3只死亡，结果表明IBV M基因的DNA疫苗能诱导鸡体产生免疫应答，并对强毒感染有抵抗力。 本研究采用IBVWHNJ基因构建的DNA疫苗对鸡进行免疫，并对其免疫效果进行评价，在国内外还未见报道。本研究为研制IBV DNA疫苗提供了科学依据。