Argonaute(AGO)蛋白是一类高度保守的碱性蛋白家族，主要包括4个结构域，分别是N端、PAZ、Middle和PIWI。其中PIWI具有RNaseH酶的活性，可以与siRNA(smallinterferingRNA)结合切割mRNA，PAZ可以非特异性的识别结合双链小RNA3’端悬垂的两个核苷酸，因此AGO蛋白参与到smallRNA(如miRNA、siRNA)的基因调控之中，AGO蛋白主要以RNA诱导沉默复合体(RISC)的形式来发挥功能。AGO蛋白功能的研究将更加有利用于揭示生物体内的基因调控机制，从而为人类疾病治疗和生物遗传发育的研究提供更加有利的条件。　　 家蚕作为人类最早驯化的动物之一，具有重要的经济价值。同时作为鳞翅目的模式生物，在研究昆虫的变态发育及农林业害虫防治中也发挥着重要的作用。目前，在家蚕发现的AGO蛋白有4种，分别是AGO1、AGO2、AGO3和PIWI，其功能目前研究的还不是很清楚。在本研究中以家蚕细胞BmN为研究对象，通过构建RNAi干扰载体，试图探究蛋白AGO1和AGO2在家蚕细胞中的功能，为进一步研究smallRNA和靶标基因之间的作用机制提供初步基础。　　 RNAi载体的构建主要是根据基因沉默的原理，RNAi载体在家蚕细胞中转录成特定的发卡结构hairpinRNA，在Dicer酶的作用下，切割成siRNA，干扰AGO1和AGO2的表达。实验中用到的载体是pBac[A3-EGFPafm]和辅助质粒phsp，辅助质粒可以在细胞内表达转座酶，将构建成功的RNAi载体和辅助质粒共转染到家蚕细胞BmN中，在辅助质粒的作用下，可以将干扰片段整合到基因组上，稳定表达。　　 利用脂质体转染的方法，将构建好的载体和辅助质粒共转染到家蚕细胞中，转染48h后开始观察细胞，直到96h后观察到绿色荧光，连续观察并记录细胞形态变化，7天后收集细胞并提取总RNA，利用real-time荧光定量PCR鉴定AGO1和AGO2基因表达的变化，本研究中以家蚕Actin-3为内参，结果显示AGO1和AGO2的基因表达量明显降低。通过记录细胞形态，发现有绿色荧光的细胞比周围的细胞有变大、变圆的趋势，这为后续对不同AGO基因进行干涉或过表达研究家蚕中小RNA表达水平的变化提供了很好的平台。