【摘 要】
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目的:探索粗糠柴毒素（Rottlerin）对宫颈癌细胞增殖、迁移、侵袭以及凋亡的影响,阐明Rottlerin与常规化疗药物顺铂联合用药对宫颈癌细胞治疗效果的影响及其相关作用机制。方法:用MTT法证实Rottlerin对宫颈癌He La细胞和Si Ha细胞增殖的影响,选择Rottlerin和顺铂的最佳药物浓度和时间;采用MTT实验检测Rottlerin和顺铂单独用药,以及联合用药对宫颈癌细胞增殖的影
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（81760468）:探索CBX7抑制宫颈癌恶性发展的分子机制研究；
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目的:探索粗糠柴毒素（Rottlerin）对宫颈癌细胞增殖、迁移、侵袭以及凋亡的影响,阐明Rottlerin与常规化疗药物顺铂联合用药对宫颈癌细胞治疗效果的影响及其相关作用机制。方法:用MTT法证实Rottlerin对宫颈癌He La细胞和Si Ha细胞增殖的影响,选择Rottlerin和顺铂的最佳药物浓度和时间;采用MTT实验检测Rottlerin和顺铂单独用药,以及联合用药对宫颈癌细胞增殖的影响;采用克隆形成实验检测Rottlerin和顺铂单独用药,以及联合用药对宫颈癌细胞克隆形成能力的影响;采用创伤愈合实验和Transwell实验分别检测Rottlerin和顺铂单独用药,以及联合用药对宫颈癌细胞迁移和侵袭能力的影响;采用流式细胞仪检测Rottlerin和顺铂单独用药,以及联合用药对宫颈癌细胞凋亡的影响;同时,我们使用实时定量聚合酶链反应（q RT-PCR）法和免疫印迹实验法（Western blot）检测单独用药和联合用药Rottlerin和顺铂对宫颈癌细胞Skp2和CBX7 m RNA和蛋白质表达的影响。结果:（1）通过MTT法筛选出的最佳给药浓度为Rottlerin 4μM和顺铂4.5μg/m L,最佳作用时间为48h;（2）Rottlerin组对宫颈癌细胞的增殖抑制率、克隆形成率、迁移率和侵袭率低于空白对照组,凋亡率高于空白对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）;（3）Rottlerin和顺铂联合用药组对宫颈癌细胞的增殖抑制率、克隆形成率、迁移率和侵袭率低于Rottlerin组、顺铂组以及空白对照组,联合用药组的凋亡率高于顺铂组、Rottlerin组以及空白对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）;（4）联合用药组的宫颈癌细胞Skp2 m RNA和蛋白质相对表达量低于顺铂组、Rottlerin组以及空白对照组;CBX7 m RNA和蛋白质相对表达量高于顺铂组、Rottlerin组以及空白对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论:Rottlerin能够抑制宫颈癌细胞的增殖、迁移和侵袭等能力,促进宫颈癌细胞凋亡,且Rottlerin在宫颈癌细胞中可能通过调控Skp2/CBX7信号通路发挥抑癌作用。与顺铂单独治疗相比,Rottlerin和顺铂联合用药疗效显著,可增强宫颈癌细胞对顺铂的敏感性。
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