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目的:观察榄香烯对人气道成纤维细胞(Human airway fibroblast,HAFB)诱导的人肺微血管内皮细胞(Human pulmonary microvascular endothelial cells,HPMEC)增殖状态和凋亡影响,并通过检测HPMEC中含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(Cysteinyl aspartate specific proteinase-3,Caspase-3)、B细胞淋巴瘤/白血病2(B cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2)、B细胞淋巴瘤/白血病2相关的X蛋白(B cell lymphoma/leukemia-2-Associateds X,Bax)的蛋白表达水平探讨其可能的分子机制,为局部应用榄香烯治疗良性气道狭窄提供新的基础实验依据。方法:(1)体外培养HAFB和HPMEC。HAFB随机分为5组:A1:对照组,DMEM干预;A2:30ug/ml榄香烯干预;A3:60ug/ml榄香烯干预;A4:90ug/ml榄香烯干预;A5:120ug/ml榄香烯干预。24h后移去旧培养基,加入DMEM继续培养24h后取出HAFB培养上清液保存备用。HPMEC随机分为6组:B1:对照组,DMEM干预;B2:常规培养的HAFB上清液干预;B3:30ug/ml榄香烯处理的HAFB上清液干预;B4:60ug/ml榄香烯处理的HAFB上清液干预;B5:90ug/ml榄香烯处理的HAFB上清液干预;B6:120ug/ml榄香烯处理的HAFB上清液干预。(2)倒置显微镜下观察不同培养基培养24h、48h、72h后HPMEC的生长情况和形态变化,MTT法检测HPMEC的增殖活性,Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术检测不同培养基处理24h后HPMEC的细胞凋亡率。(3)体外培养HPMEC,随机分为3组:G1:对照组,DMEM干预;G2:常规培养的HAFB上清液干预;G3:60ug/ml榄香烯处理的HAFB上清液干预。处理24h后提取HPMEC的总蛋白,Western blot法检测HPMEC中Caspase3、Bcl-2、Bax的表达水平。结果:(1)与对照组相比,常规培养的HAFB上清液对HPMEC增殖状态的影响没有统计学差异(P>0.05),且不具有时间依赖性(P>0.05)。与对照组相比,榄香烯处理的HAFB上清液能抑制HPMEC增殖(P<0.05)。且榄香烯处理的HAFB上清液对HPMEC增殖活性的调节具有剂量依赖性(P<0.05)而没有时间依赖性(P>0.05)。(2)与对照组相比,常规培养的HAFB上清液干预HPMEC后,HPMEC细胞形态没有明显改变。与对照组相比,不同浓度的榄香烯处理的HAFB上清液使HPMEC细胞形态发生改变,且随着榄香烯浓度的升高,HPMEC细胞排列变得不规则,细胞间隙逐渐变大。(3)与对照组相比,常规培养的HAFB上清液干预HPMEC后,HPMEC细胞早期凋亡率有所上升(P<0.05)。与对照组相比,榄香烯处理的HAFB上清液干预HPMEC后,HPMEC细胞早期凋亡率明显升高(P<0.01),且榄香烯浓度越高,早期凋亡率越高(P<0.01)。(4)与对照组相比,常规培养的HAFB上清液干预HPMEC后Caspase3的表达水平没有统计学差异(P>0.05)、Bcl-2表达下调(P<0.05)、Bax表达下调(P<0.01)。与对照组相比,60ug/ml榄香烯处理的HAFB上清液干预HPMEC后Caspase3表达上调(P<0.01)、Bax表达上调(P<0.01)、Bcl-2表达下调(P<0.01)。结论:经榄香烯处理过的HAFB上清液可通过诱导HPMEC细胞凋亡,从而抑制HPMEC细胞增殖;其分子机制可能与Bax、Caspase-3表达水平的上调和Bcl-2表达水平的下调有关。