手性选择剂修饰的磁性颗粒的制备及其应用研究

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手性化合物在自然界的整个生命体中是广泛存在的,对生物体进行正常生理活动起着重要的作用。由于手性化合物中两个对映异构体在生物体内具有不同的生理药理活性,因此对手性化合物进行识别和拆分在生命科学、药物临床研究等领域中具有重要的意义。目前,大多数常用于手性化合物的分离方法具有不同的特点和优势,但存在着手性选择剂用量大、分离回收困难、分析成本高、操作复杂等因素,使其应用受到一定的局限。如何构建一种简单、快速、高效的手性化合物分离方法一直是手性分离领域面临着一个亟需解决的问题。近年来,磁性纳米颗粒由于其具有独特的磁响应性和超顺磁性、优良的纳米尺寸效应和良好的生物相容性等特征,已广泛应用于生物医疗、环境分析、生物分离、催化等领域中。本论文将手性选择剂修饰到磁性颗粒的表面直接用于手性化合物的分离。为了获得良好的手性分离效果,提高手性选择剂在磁性颗粒表面上的固载量,分别制备了磁性介孔微球、磁性聚合物微球、树枝分子修饰的磁珠,并将大环抗生素类、环糊精类、蛋白质类手性选择剂修饰到磁珠的表面,制备了不同功能化的手性选择剂修饰的磁性颗粒,并应用该功能化磁珠分离分析了多种手性化合物。初步建立了一种基于磁性纳米手性选择剂对手性化合物分离的方法。该方法操作简单,在实现高效手性分离的同时,又可以快速实现手性选择剂的回收与再利用,为后续开展与毛细管电泳法用于手性化合物的在线分离分析建立了基础。研究工作主要从以下几个方面进行。(1)以Fe3O4磁性纳米粒子作为载体,表面经过Si02包覆后,使用十六烷基三甲基溴化铵作为模版剂,采用表面活性剂自组装法制备了磁性介孔微球,并将大环抗生素类手性选择剂修饰到磁珠表面,制备了替考拉宁功能化的磁性介孔微球。合成的功能化磁性介孔材料具有规整的核壳式球形结构,比表面积大,磁响应性强。介孔材料的引入能够显著提高替考拉宁在磁珠表面上的固载量。将替考拉宁固定化的磁性介孔微球用于直接手性分离五种外消旋化合物,重复使用五次后,仍然保持着较好的手性分离能力,为后续制备不同功能化手性选择性的磁性颗粒并用于多种不同种类手性化合物的分离建立了基础。(2)β-环糊精及其衍生物是一类最为重要的手性拆分剂,能够拆分手性化合物的范围更广。将β-环糊精经过改性后,由于新官能团的引入能够增加其手性识别位点,进而增强其手性识别能力。以天然的β-环糊精为原料,采用微波辅助合成法制备了乙烯基咪唑阳离子β-环糊精衍生物,并通过聚合反应修饰到磁性颗粒表面制备了乙烯基咪唑阳离子β-环糊精氯修饰的磁性聚合物微球,并直接用于三种氨基酸手性化合物的分离。合成的功能化手性材料呈规则的球形,具有良好的分散性和较强的磁响应性,对三种丹磺酰氨基酸具有较好的手性分离能力,能够通过外加磁场的操作快速实现手性选择剂的分离与回收。(3)为进一步提高手性选择剂在磁珠表面上的固载量,采用微波辅助合成法制备了聚酰胺-胺(PAMAM)树枝分子修饰的磁珠,并直接用于蛋白质类手性选择剂HSA的固定化,考察了PAMAM修饰的磁珠固定化HSA的生物活性和生物相容性。随后将其用于直接手性分离三种外消旋化合物,分离结果表明,随着树枝分子代数的生长,HSA功能化磁珠的手性识别能力增强,3代树枝分子修饰的磁珠固定化HSA后表现出了良好的手性分离能力。PAMAM树枝分子的引入显著提高了HSA在磁珠表面上的固载量,进而提高了其手性分离能力,为在手性分离过程中手性拆分效果差的问题提供了新的解决办法和途径。
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